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    影響吸收光度法的因素主要有以下幾種：

   （一）溶液中被測(cè)物質(zhì)的濃過(guò)高或在稀釋時(shí)受到的其它副反應(yīng)的影響

    根據(jù)光吸收定律，當(dāng)吸收槽厚度固定時(shí)，顯色溶液的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度成正比，這是吸收光度法的基礎(chǔ)。但是在某些情況下也有例外，例如當(dāng)被測(cè)物質(zhì)變成有色絡(luò)合物之后，如如果稀釋這種溶液，有色絡(luò)合物的濃度不能按稀釋的濃度成正比例的減低，而往往是更低些，結(jié)果便會(huì)造成誤差，或者被測(cè)物質(zhì)在較高濃度時(shí)生成了配位數(shù)不同的其它絡(luò)合物，因而呈顯出其它不同的顏色，或使溶液顏色變淺，或是由于被測(cè)物質(zhì)在較高濃度時(shí)，能被掩蔽劑部分地掩蔽，也會(huì)產(chǎn)生誤差。因此，所用顯色劑量應(yīng)該稍大一些。此外，在實(shí)際分析過(guò)程中，應(yīng)盡盡可能使試祥與標(biāo)準(zhǔn)試樣的濃度一致，以減少誤差對(duì)結(jié)果的影響響。而濃度相差太大時(shí)，會(huì)造成很大的誤差差。顯色時(shí)濃度控制在什么范圍內(nèi)，要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件來(lái)決定。

   （二）溶液pH值的影響

    大多數(shù)金屬離子的顯色反應(yīng)都要求在一定酸度下進(jìn)行，溶液的酸度不同，會(huì)影響溶液顯色程度，或顯什么色。吸收光度法中所用的顯色劑很多，但多為弱酸型的有機(jī)絡(luò)合劑，以Me+代表金屬離子，HR代表弱酸型的顯色劑，其顯色反應(yīng)如下：

Me++HR<=>MeR＋H+

    顯然酸度太大時(shí)，反應(yīng)道向進(jìn)行，并使顯色反應(yīng)難以進(jìn)行，或者反應(yīng)不完全。

    另一方面，由于HR屬于弱酸型，當(dāng)酸度太小時(shí)R度增加，對(duì)一些配位數(shù)不飽飽和的絡(luò)合物，可引起有色絡(luò)合物配位數(shù)的改變。用水楊酸測(cè)定三價(jià)鐵就屬于這種情況：當(dāng)PH＜4時(shí)，生成紫色絡(luò)合物；pH＞4時(shí)，又轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色絡(luò)合物。

    有時(shí)顯色劑本身就是酸堿指示劑。例如二甲酚橙、茜素等，當(dāng)溶液pH改變時(shí)，試劑本身就發(fā)生顏色的改變，這就會(huì)干擾金屬離子的光度測(cè)定。

    由此可見，在顯色時(shí)，一定要適當(dāng)?shù)剡x擇和嚴(yán)格控制酸度值。

    (三）溫度的反應(yīng)

    一般顯色反應(yīng)可在室溫下完成。但是有的在室溫下進(jìn)行得很慢，需要加熱促使反應(yīng)迅速完成，或需放置一段時(shí)間才能使反應(yīng)進(jìn)行完全。顯然，顯色反應(yīng)的進(jìn)行與溫度有很大關(guān)系。因此，對(duì)于不同的顯色反應(yīng)，應(yīng)選擇適宜的溫度進(jìn)行反應(yīng)。同樣標(biāo)樣和試樣顯色時(shí)，其溫度應(yīng)很近似。另一方面，還必須注意，有的顯色反應(yīng)所形成的絡(luò)合物在溫度高時(shí)會(huì)發(fā)生分解或褪色。

   （四）時(shí)間的影響

    有些有色化合物能迅速形成，但是不太穩(wěn)定，放置過(guò)程中顏色會(huì)改變，故吸收光度測(cè)定不能擱置太長(zhǎng)。有些有色化合物形成很快，而且相當(dāng)穩(wěn)定。在這種情況下，最利于進(jìn)行吸收光度分析。有些有色化合物形成較慢，必須放置一段時(shí)間后才能進(jìn)行吸收光光度測(cè)定。總之，不同的顯色反應(yīng)顏色達(dá)到最大的吸收強(qiáng)度所需時(shí)間是不同的，而且保持顏色穩(wěn)定的時(shí)間范圍也是不同的。所以，為了測(cè)得準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)在保持顏色穩(wěn)定的時(shí)間內(nèi)測(cè)定吸光度。

   （五）顯顯色劑濃度的影響

    顯色劑的加入量對(duì)顯色后溶液顏色深淺關(guān)系很大。以Me＋表示金屬離子，R代表顯色劑陰離子，MeR代表有色化合物，其反應(yīng)如下：

ME(N+)+R(n-)<=>MER

    可見顯色劑愈多，能促使有色化合物MeR更多地生成，并使溶液顏色變深。因此，般顯色劑應(yīng)加過(guò)量一些。但如果過(guò)量程度不致，則反應(yīng)轉(zhuǎn)化成MeR程度也不一致。另外，顯色劑本身帶有顏色，顯色劑濃度不同，由其所產(chǎn)生的顏色深度也就不同因此，在測(cè)定過(guò)程中，加入試樣溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液中顯色劑的量應(yīng)完全一致。在校零點(diǎn)時(shí)，所用空白溶液雖然不含被測(cè)成分也要加入同樣量的顯色劑。

   （六）其它物質(zhì)的影響

    在實(shí)際分析中與待測(cè)試液一起常常有大量的共存離子與被測(cè)離子同時(shí)存在，可能干擾測(cè)定。因此在進(jìn)行一項(xiàng)分析之前，首先必須査清有那些共存和干擾離子以及干擾的情況，以采取適當(dāng)?shù)拇胧┲敝劣梅蛛x干擾元素來(lái)消除干擾。共存離子的干擾作用大致有以下三種情況：

     1．干擾離子本身有顏色，在被測(cè)物所選用的波長(zhǎng)附近有明顯的光吸收，但不因加入試劑而改變。這種正干擾作用比較容易消除。例如可以用樣品溶液（不使被測(cè)離子顯色）做參比溶液測(cè)量吸光度進(jìn)行抵消；改變所選用的波長(zhǎng)，使有色離子的光吸收可以忽略；在標(biāo)準(zhǔn)溶液中配入相同量有色離子等。

   2．干擾離子（不論本身有無(wú)顏色）能與顯色劑生成有色化合物。這也是正干擾作用。這時(shí)，一般采取加掩蔽劑（氧化劑或還原劑）或分離的方法消除干擾。

    3．干擾離子阻止被測(cè)離子與顯色劑的反應(yīng)，致使顯色反應(yīng)進(jìn)行不徹底，而產(chǎn)生負(fù)干抗這是因?yàn)楦蓴_離子與顯色劑相互作用，雖然不產(chǎn)生光吸收，但與被測(cè)離子爭(zhēng)奪試劑，使被測(cè)離子不能充分顯色。在這種情況下有時(shí)用增加顯色試劑的用量來(lái)消除干擾；或當(dāng)干擾離子與被測(cè)離子之間生成絡(luò)合物（包括雜多酸絡(luò)合物），這時(shí)常須將干擾離子分離或驅(qū)除，或加入另一種干擾離子或絡(luò)合劑將干擾離子絡(luò)合。應(yīng)注意的是，有時(shí)一種離子可同時(shí)具有上述第2、3兩種干擾作用。例例如以丁二肟法測(cè)定鎳時(shí)，當(dāng)丁二肟量少時(shí)，鈷和銅離子爭(zhēng)奪丁二肟（生成淺色絡(luò)合物）產(chǎn)生負(fù)誤差；但當(dāng)丁二肟過(guò)量很多時(shí)，鎳能充分顯色，則鉆和銅的淺色絡(luò)合物造成正誤差，鉻（I）也有類似的作用。

   （七）儀器的影響

     吸收光度分析時(shí)儀器也會(huì)引起一定測(cè)定誤差。在敘述光吸收定律時(shí)，我們?cè)鴱?qiáng)調(diào)指出，它只適用于單色光。在實(shí)際工作中，從儀器的濾光片或單色器出來(lái)的光總是具有一定波段寬度的光（只不過(guò)根據(jù)儀器性能寬窄不同罷了），以及一些散射光，即總是夾雜著一些除我們所需要波長(zhǎng)以外的一些光，稱為雜色光。雜色光的存在，會(huì)使溶液總的吸光度減少，而且雜色光越多（即單單色性越差），溶液濃度也越大，這樣吸光度減少得越多。這就是為什么吸收光度法的濃度一吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線在濃度大時(shí)出現(xiàn)向濃度坐標(biāo)彎曲的原因，而且以黃色的顯色液尤甚（因?yàn)樵谶@種波段單色器的色散性能最差）。

    此外，若比色皿的厚度不完全相同，比色玻璃帶有顏色，光電池的“疲勞”，檢流計(jì)刻度不準(zhǔn)確，單色器吸收光度計(jì)光源電壓不穩(wěn)定等，都會(huì)引起光度法的分析誤差。