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   （一）吸收光度法加和性的利用

    根據(jù)囁收光度的定義，某一溶液的吸光度為入射光強(qiáng)度與透射光強(qiáng)度之比的對(duì)數(shù)值。如果溶液中只有一種吸光物質(zhì)，則根據(jù)光吸收定律，所測(cè)得的吸光度與該物質(zhì)濃度成正比。但是如果溶液中有兩種或兩種以上的吸光物質(zhì)（最普通的就是金屬離子與顯色劑形成的絡(luò)合物以及顯色劑本身兩種），這時(shí)測(cè)得溶液是兩種（或兩種以上）吸光物質(zhì)吸光度之和。這就是光的加和性，在實(shí)際工作中用處很大。例如測(cè)定吸光度時(shí)參比溶液的選擇，混合離子的測(cè)定，干擾物質(zhì)吸光度的抵消或扣除等，都是以光的加和性為基礎(chǔ)，采取有關(guān)措施可提高測(cè)定的準(zhǔn)確度的。

   （二）參比溶液的選擇

    如前所述，吸光度的測(cè)定主要是測(cè)定入射光與透射光強(qiáng)度之比，但在實(shí)際測(cè)定中，而是選擇一種溶液，稱為參比溶液做比較標(biāo)準(zhǔn)，將被測(cè)溶液的透射光強(qiáng)度與參比溶液的透射光強(qiáng)度相比較；參比溶液可以是純?nèi)軇ㄒ话闶撬?，也可以是有色溶液。參比溶液主要?/span>抵消被測(cè)物中不需要部分的吸光度，測(cè)定所需的吸光度；因此合理使用參比液，可提高光度法的準(zhǔn)確度。

   （三）吸光度與波長(zhǎng)的選擇

    我們知道，通常所謂的白光，如日光，白熾燈光，實(shí)際上是具有從400～750毫微米（就可見光范圍而言）波長(zhǎng)的連續(xù)光譜的混合光。當(dāng)混合光通過溶液時(shí)，一部分光被吸收，另一部分光透過溶液。由于透射光波長(zhǎng)范圍的不同，人眼所感覺到的顏色也不同。

    如果將色光混合，即將被吸收部分和透射部分仍以一定強(qiáng)度比混合，則仍將獲得“白光”。實(shí)際上在400750毫微米波長(zhǎng)范圍內(nèi)，除498～566毫微米波段的光外，其它各種顏色的“單色光”均可找到另一種顏色的“單色光”與其“互補(bǔ)”。如576毫微米的黃色光與475毫微米的藍(lán)色光按適當(dāng)?shù)膹?qiáng)度比混合后，即得白光。至于498～566毫微米波段內(nèi)的光，其補(bǔ)色光系非單色光，即為混合色光紅紫色，這種光在單色光中是找不到的。各種顏色的光互補(bǔ)的關(guān)系見圖46所示。

    在比色分析中中，濾光片的選擇大體就根據(jù)這種互補(bǔ)關(guān)系，即濾光片的透射光顏色與溶液顏色互補(bǔ)。表133示出了581G型比色計(jì)濾光片。

    選擇合適波長(zhǎng)的入射光可消除于擾擾。當(dāng)溶液中存在其它有色離子時(shí)，如用PAR顯色劑測(cè)定鈮時(shí)，試劑本身有色，Nb－PAR的絡(luò)合物吸收峰在530～550毫微米之間，而顯色劑的光吸收從530550毫微米逐漸降低。為此可考慮在550毫微米處進(jìn)行測(cè)定，此時(shí)顯色劑的吸光度較小，或利用吸光度的加和性在空白溶液中加入相同量的顯色劑，也可得到較準(zhǔn)確的結(jié)果。

   （四）吸吸收光度法適用的測(cè)量范圍

    根據(jù)顯色溶液遵守光吸收定律，可估計(jì)出吸收光度法適用的測(cè)量范圍及分析步驟。如果要求測(cè)定含量低于或高于此范圍，則可通過改變稱樣（或分?。┝?，顯色體積或比色皿厚度進(jìn)行調(diào)整，使之適應(yīng)要求。

   （五）吸收光度法適用的試樣品種范圍

    主要注意干擾元素種類允許限量，分離，掩蔽或校正干擾的措施，并與要求分析試樣成分對(duì)照，判定方法是否實(shí)用或需要采取附加措施施。對(duì)于分析試樣樣，應(yīng)盡可能事先了解其含有元素成分。在無法知道成分而又懷疑有干擾時(shí)，則應(yīng)設(shè)法驗(yàn)證分析結(jié)果的可靠性。例如做標(biāo)準(zhǔn)溶液回收試驗(yàn)等。

   （六）吸收光度法的操作靈敏度及吸光度穩(wěn)定性5『9，0

    根據(jù)顯色時(shí)取樣量，顯色體積，比色皿厚度等條件，估算出在固定操作條件下，測(cè)定出0．01吸光度相當(dāng)于被測(cè)元素在試樣中多大的百分含量，即操作靈敏度。據(jù)此可粗略估計(jì)測(cè)定的重復(fù)性或準(zhǔn)確度，以判斷該方法能否滿足允許公差要求，或需要通過增加取樣量，加大比色皿厚度，或增加測(cè)量次數(shù)等等，以提高操作靈敏度，滿足公差要求。

   （七）使用標(biāo)準(zhǔn)透光率滲液校正讀數(shù)標(biāo)尺

    曾有人準(zhǔn)確測(cè)定了濃度為0．0400克／升的K：CrO，溶液（以0．05M氫氧化鉀溶液配制在不同波長(zhǎng)下的透光率值，可用作校驗(yàn)儀器讀數(shù)標(biāo)尺，消除因標(biāo)尺不準(zhǔn)帶來的誤差，提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。其標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)如表134所示。

    （八）使用差示光度法提高測(cè)定的精度

     差示光度法是用一種比測(cè)定試樣稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比液與測(cè)定試樣溶液相比較，測(cè)量其吸光度，再從測(cè)得的吸光度求得溶液未知濃度。差示光度法與普通光度法相比較，前者大大提高了測(cè)量精確度和再現(xiàn)性，適于高含量或低含量光度的測(cè)定。

    對(duì)于高含量元素的測(cè)定，一般的吸收光度法主要依靠少取樣，稀釋或改用小比色皿等辦法，使顯色溶液吸光度降至適宜范圍內(nèi)。這樣可保持測(cè)定的相對(duì)誤差大致不變，但絕對(duì)誤差往往超出允許公差規(guī)定。采取差示光度法則可能使高含量的測(cè)定保持較高的準(zhǔn)確度。

    假設(shè)測(cè)定某一元素，稱樣0．5克，含量為1．0％，分取試液后顯色，所測(cè)定的吸光度為0．65，即操作靈敏度約0．015％（被測(cè)元素／0．01吸光度）。設(shè)吸光度波動(dòng)范圍為0．02，則可估計(jì)測(cè)定絕對(duì)誤差約為（0．015×2）％＝0．030％?，F(xiàn)假定一試樣含量量為2．5％，若仍稱樣0．5克，吸光度將為0．65×2．5＝1．625，顯然讀數(shù)太高。按一般做法，可以少稱樣設(shè)為0．2克，其他操作不變，則吸光度讀數(shù)將為1．625、0．2＝0．65。吸光度波動(dòng)范圍仍是0．02，但這時(shí)因操作靈敏度下降（為0．015×2．5＝0．0375％被測(cè)元素／0．01吸光度），測(cè)定的絕對(duì)誤差將為0．0375×2＝0．075％。但是采取差示光度法，例如用含量約1．5％（稱樣0．5克時(shí)吸光度為1．0）的同品種標(biāo)樣顯色后做參比溶液，則因?yàn)楸粶y(cè)溶液吸光度將被抵消1，0，所以含量2．5％的試樣也可稱取0．5克顯色，其吸光度讀數(shù)為1．625－1．0＝0，625這時(shí)操作靈敏度仍為0．015％／0．01吸光度，測(cè)定絕對(duì)誤差為0，030％。以上情況示于表135。

    注：表中按0．02吸光度計(jì)算。
    由上表可知，差示光度法可以提高測(cè)定準(zhǔn)確度，它不僅允許稱樣較多，同時(shí)也提高了測(cè)量（讀數(shù)）精度。如前例例，用吸光度為1．0的顯色液為參比溶液，使吸光度讀數(shù)1．625變?yōu)?．625，相當(dāng)于將讀數(shù)標(biāo)尺上1．0至1．625一小段距離擴(kuò)大到讀數(shù)由0至0．625的大段距離。除此之外，如果果用柞品標(biāo)樣做參比溶液（這是容易做到的），可將幾乎所有的干擾（非所測(cè)成分產(chǎn)生的吸光度）抵消，有利于提高測(cè)定的準(zhǔn)確度。
    因?yàn)樵诓钍竟舛确ㄖ惺褂脜⒈热芤旱闹饕饔檬堑窒舛?，所以在?shí)際工作中還可采用許多其它措施，例如用電補(bǔ)償扣除吸光度；或用毛玻璃擋光扣除吸光度等。
    無論采用何種方式抵消吸光度，都會(huì)受到儀器光源強(qiáng)度，接受器靈敏度等限制。即不能無限提高參比溶液（或其他抵消）抵消吸光度的性能，只能將其吸光度讀數(shù)調(diào)至零。此外，顯色劑本身顏色很深，往往也限制了差示光度法的應(yīng)用。

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