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分光光度計的工作原理與操作


實驗室k / 2019-02-28

72型分光光度計的工作原理

       國產(chǎn)72型分光光度計的基本工作原理與上述單光電池光電比色計相似,但分光光度計的單色光器比濾光片所選擇的波長范圍小的多,可以認(rèn)為近似單色光;其次加設(shè)了穩(wěn)定電壓的專門裝置;微電流檢流計也比較精密一些,且單獨另設(shè)一個裝置系統(tǒng)。為攜帶、運輸方便,72型分光光度計制作成三個組成部分。

       圖7-28是72型分光光度計的光學(xué)系統(tǒng)工作原理示意圖。

       從光源1發(fā)出白光,經(jīng)過光狹縫2射到反射鏡3,反射到聚光透鏡4后,成為平行光射入棱鏡5。經(jīng)棱鏡折射色散后,各種波長的單色光排列成光譜的形狀射在鍍鋁的反射鏡6上,反射鏡可以轉(zhuǎn)動選擇某種所需波長的單色光反射到聚光透鏡7上(與反射鏡裝在一個控制盤上)。從透鏡7射出的光是單色的平行光,經(jīng)過出光狹縫8射到盛有色溶液的比色槽9。沒被溶液吸收的透過光,經(jīng)光亮調(diào)節(jié)器10射到硒光電池11上,光電池產(chǎn)生的光電流產(chǎn)生磁場帶動鏡式檢流計映出光亮點射在檢流計的標(biāo)尺上。讀取數(shù)據(jù),進行計算求出溶液中所含物質(zhì)的量。

72型分光光度計的操作法

       為敘述方便,參看(圖7-29)72型分光光度的外形示意圖加以說明。

       (1)按接線要求將穩(wěn)壓器和微電流計接在單色器上。注意微電流計和單色器相接時,三股接線顏色是:紅色接“+”,綠色接“-”,黃(或黑)色接。單色器要接在穩(wěn)壓器的輸出接線柱上。

       (2)電源電壓與儀器電壓相符時,插上電源。

       (3)把單色光器的光路閘門扳到黑點(光路關(guān)閉指示)位置后,再將微電流計上的電源開關(guān)扳到開處。此時指示光亮點即出現(xiàn)在檢流計標(biāo)尺上。用0點調(diào)節(jié)器將光亮點準(zhǔn)確地調(diào)至透光率標(biāo)尺的0刻度上。

       (4)打開穩(wěn)壓器的電源開關(guān)和單色器的光源開關(guān),把光路閘門扳到紅點(光路打開指示)上,再以順時針方向調(diào)光亮調(diào)節(jié)器至光門適當(dāng)開啟,使微電流計上光亮點達到標(biāo)尺上限附近。停10分鐘后,待光電池趨于穩(wěn)定后再開始操作。

       (5)將單色光器上的光路閘門再扳回黑點處,重新校正微電流計的指示光亮點于0位上,立即開啟光路閘門。

       (6)將比色槽暗廂蓋打開,取出比色槽架,將四只比色槽中的一只裝入蒸餾水或空白溶液,其余三只裝被測樣品溶液。將比色槽置于架上,空自溶液槽放在第一格上,放回暗廂內(nèi),加蓋蓋好。先將空白溶液槽推入光路。

       (7)用波長調(diào)節(jié)器選好所需波長對準(zhǔn)紅線。將光亮調(diào)節(jié)器以順時針或逆時針方向輕輕轉(zhuǎn)動,使光亮點中線準(zhǔn)確地對準(zhǔn)透光率100的刻度上。

       (8)以上調(diào)節(jié)好后,可以進行樣品溶液的比色測定。將比色槽的定位裝置拉桿輕輕拉出一格,使第二個比色槽內(nèi)的待測溶液進入光路。此時,微電流計標(biāo)尺上光亮點所指示的讀數(shù)即為該溶液的光密度或透光率。依此測定第二、第三個待測溶液,并讀出數(shù)據(jù)。

       (9)儀器在使用過程中,應(yīng)經(jīng)常關(guān)閉光路閘門來核對微電流計的0點位置是否有改變。如有改變,及時用0點調(diào)節(jié)器糾正。

       注意某一測定溶液所需的波長往往有一個范圍,即有幾個波長均可作該溶液的吸收光帶,這時一般選用吸收度最大的波長。

       所制成的溶液濃度應(yīng)盡量使光密度值在0.1~0.6的范圍以內(nèi)進行測定。這樣所測得的讀數(shù)誤差較小。如光密度在0.1~0.6范圍外,可調(diào)節(jié)溶液濃度,稀釋或加濃,或者改選擇適當(dāng)波長的單色光。


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