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色譜分析法的分類有哪些?


實驗室k / 2019-07-25

       自1903年Tswett M.創(chuàng)立色譜分析法(chromatography)以來,已有八十多年的歷史。從早期的干吸附劑裝柱發(fā)展為濕法裝柱,其后陸續(xù)出現(xiàn)了薄層色譜、氣相色譜、高壓液相色譜等各種色譜技術(shù)。近年來,由于色譜理論研究的逐步深入,電子技術(shù)和電子計算機的應(yīng)用,促進了各種色譜技術(shù)的改善和創(chuàng)新。目前色譜法已成為分析化學(xué)中富有生命力的分支之一。

       Tswett以碳酸鈣作吸附劑裝填于玻璃管中,用以分離植物色素。他將植物色素的石油醚提取液倒入柱頂,然后再加入純的石油醚進行洗脫,結(jié)果在柱管內(nèi)形成各種顏色的色素區(qū)域,謂之色帶,故而得名色譜分析。然而,隨著分離對象的擴大,許多無色物質(zhì)也能用這方法進行分離,故也有稱此為層析法和層離法的。色譜這個名詞雖已不能如實地反映實驗現(xiàn)象,但它們都符合Keuleman所作的定義:“色譜法是一種物理分離方法,欲分離的混合物在兩相之間發(fā)生分布,其中一相是由有巨大表畫積的固定床組成,另一相是可通過或沿著固定床沙濾的流體。”
       固定相可以是固體或液體,流動相可以是液體或氣體。據(jù)此可將目前所有已知類型的色譜技術(shù)歸納為四大類,即液固色譜(liquid-solid chromatography)、液液色譜(liquid-liquid chromatography)、氣固色譜(gas-solid chromatography)、氣液色譜(gas-liquid chromatography)。也可按照色譜分離過程所依據(jù)的物理化學(xué)原理予以分類,或按照進行色譜實驗的色譜床分類,現(xiàn)將各種分類的名稱綜合列表如下(表14-1)。
表14-1  色譜法的分類
流動相 液體 氣體
固定相 固體 液體 固體 液體
名稱 液固色譜 LSC 液液色譜 LLC 氣固色譜 GSC 氣液色譜 GLC
按色譜分析所依據(jù)的原理分類名稱 吸附色譜 離子交換色譜 凝膠色譜 分配色譜 吸附色譜 分配色譜
可以采用的色譜床

1.平面色譜

2.柱色譜

1.填充柱

2.毛細管柱(包括空心柱和填充柱)

       與其他分離方法,如蒸餾、結(jié)晶、沉淀、萃取法相比,色譜法具有極高的分離效率,不僅可使許多性質(zhì)相近的混合物分離,還可使同分異構(gòu)體獲得分離。它已成為各種實驗室的常規(guī)手段。其缺點是定性能力較差。然而,色譜法廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等學(xué)科及其各分支領(lǐng)域。
       它是分離和純化最小分子(H2和D2)及大分子(蛋白質(zhì)、核酸分子),甚至亞細胞結(jié)構(gòu)、線粒體和細菌等物的最有效手段之一。此外,在對大氣和水質(zhì)污染的評價,對糧食、水果、蔬菜及中藥材中農(nóng)藥殘留量的測定中也得到廣泛應(yīng)用。
       根據(jù)目前有關(guān)色譜理論的研究,已能對色譜分離過程中的有關(guān)分離機理、影響分離的因素、最佳色譜分離操作條件的選擇、色譜區(qū)帶的分布與擴散、分離效率的估價等問題作出適當(dāng)?shù)恼f明,對某些問題還能以數(shù)學(xué)形式表達。

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