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高效液相色譜的應(yīng)用

實(shí)驗(yàn)室k / 2019-08-02

HPLC在醫(yī)藥方面的應(yīng)用是普遍而有效的，例如藥物及其代謝產(chǎn)物的分析，包括生物胺、甾體激素、抗生素、各種甙類等化合物的分離分析和測定，當(dāng)然，它對(duì)中草藥有效成分的分離分析也同樣是常用的工具。

1.強(qiáng)心甙的分離分析 從植物或中草藥中提取強(qiáng)心甙，所得的產(chǎn)物常是復(fù)雜的混合物，甚至已純化的產(chǎn)品也還含有微量的類似物，只有高效的分離方法才能達(dá)到分析目的。F.Erni等用反相分配色譜分離毛地黃強(qiáng)心甙是一個(gè)很好的實(shí)例，圖16-7。

強(qiáng)心甙注射液可直接進(jìn)樣分析，若是片劑經(jīng)磨碎后用移動(dòng)相溶劑提取后也可直接分析。

柱：10μ—C18，30cm×3.5mm I．D．；流動(dòng)相：37％乙腈/水；流量：1.4ml/min；檢出：UV，220nm。

2.魚藤酮類化合物的分離 魚藤酮對(duì)人毒性小，可作為除蟲劑，但近來發(fā)現(xiàn)它有致癌作用，因此需進(jìn)行純度分析。圖16-8為魚藤酮的HPLC圖譜。

柱：ODS(6～10μm)，25cm×2.1mm I．D．；流動(dòng)相：甲醇:水:磷酸(60:39.9:0.1)→(梯度)甲醇:水:磷酸(85:14.9:0.1)，1％/min；流量：0.8ml/min；檢出：UV，254nm。

3.脂質(zhì)和脂肪酸類化合物的分離 脂質(zhì)成分包含非常廣的極性范圍，需用梯度洗脫才能分離，故示差折光檢測器不能使用。它們?cè)赨V-254nm波長又無吸收。只可通過衍生物的制備來達(dá)到分離檢測。

Borch將脂肪酸進(jìn)行苯乙醇酯化，可用UV-檢測器進(jìn)行檢測。圖16-9為九個(gè)脂肪酸經(jīng)酯化后的分離情況。

柱：Zorbax ODS，25cm×2.1mm I．D．；流動(dòng)相水：甲醇(40/60→直線梯度，1％/min)；壓力：100kg/cm2(9.80665×10(6次方)Pa)；檢出：UV，220nm。

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