液相色譜用儀器組成
抖化學(xué) / 2022-11-05
溶劑貯槽
溶劑貯槽應(yīng)具有250毫升的容量，”最好配有干燥管以防止溶劑從大氣中吸水。貯槽可用玻璃或不銹鋼制成，但如用玻璃的則應(yīng)為琥珀色，以防止吸收紫外線而引起氯代烴的分解。
溶劑泵
溶劑泵有兩種類型一一注射型或振動(dòng)隔膜或活塞型。后一種類型較好，因其在更換溶劑時(shí)易于清洗，從而減少了溶劑的消耗。
隔膜或活塞型泵還可在泵前低壓產(chǎn)生梯度，而且可對(duì)梯度系統(tǒng)使用任何種數(shù)的溶劑。另方面，注射泵類則每種溶劑就要求有一個(gè)泵?；钊蚋裟ば烷y的泵容量應(yīng)為100~200微升，并在入口壓力高達(dá)35兆牛頓/米²(5000磅/英寸²)時(shí)提供0.1到10毫升/分
的流速。為了制備工作而使用大口徑柱子時(shí)，泵只須產(chǎn)生14兆牛頓/米²(2000磅/英寸²)的壓力，但需提供高達(dá)100~ 150毫升/分的流速。
注樣裝置
基本上有兩種類型的注樣系統(tǒng)一注射 器或樣品閥。注射器采用一個(gè)橡皮隔膜，可工作于高達(dá)14兆牛頓/米² (2000磅/英寸²)，并可用來(lái)直接注入填充物內(nèi)，這樣可以得到最高的柱效。但此方法有可能擾亂填充物頂部，所以常在填充物頂部放置- -塊
多孔的燒結(jié)材料，樣品即注在此燒結(jié)材料上。這種注樣方法提供重現(xiàn)性較好的結(jié)果，但效率稍低?？?得到能工作于高達(dá)42兆牛頓/米(6000磅/英寸²)的進(jìn)樣閥。這類進(jìn)樣閥更易于操作，與樣品注射在多孔燒結(jié)料上產(chǎn)生相同的理論塔板數(shù)，給出重現(xiàn)性很好的結(jié)果，因此對(duì)于重復(fù)的分析是理想的。
柱
推薦使用長(zhǎng)度100、250或500毫米和外徑6.85毫米(1/4英寸)或更大的色譜柱。這些柱填充了微粒固定相時(shí)，在純分析性分離和利用幾個(gè)毫克溶質(zhì)的半制備性分離之間提供了良好的折衷。一根填充了10微米硅膠或鍵合相的250毫米柱，至少應(yīng)得到5000
理論塔板，即每米20000理論塔板數(shù)。如果采用薄殼填充物，則應(yīng)采用較長(zhǎng)的柱和更小的直徑。例如對(duì)于薄殼離子交換介質(zhì)，通常采用內(nèi)徑1.59毫米( 1/16英寸)的1米柱子。
檢測(cè)器
對(duì)液相色譜法的一般工作有三種檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器、移動(dòng)絲檢測(cè)器和折光率檢測(cè)器。
單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器
這種檢測(cè)器最常用，具有的最高靈敏度在信噪比2的時(shí)候約為10~8克/毫升。靈敏度變動(dòng)于10~7和10~9克/毫升之間，取決于所測(cè)物質(zhì)的消光系數(shù)。該檢測(cè)器可用于梯度洗脫，但選擇的溶劑只限于在所采用波長(zhǎng)處不具明顯UV發(fā)色團(tuán)的那些物質(zhì)。檢測(cè)器的缺點(diǎn)是不能檢出在UV區(qū)沒(méi)有吸收的物質(zhì),因此不能檢測(cè)出樣品中未知數(shù)目的組分或甚至已知共存在的組分。這種檢測(cè)器是比較便宜的。
移動(dòng)絲檢測(cè)器
這種檢測(cè)器體積大、昂貴并最難操作。然而，它能檢出柱中流出的所有非揮發(fā)性含碳物質(zhì)，其響應(yīng)值大致與溶質(zhì)的含碳量成正比。其結(jié)果是用這一檢測(cè)器所得到的色譜圖，在不同的洗脫溶質(zhì)之間給出定量關(guān)系的正確效果。當(dāng)用于梯度洗脫時(shí)，任何極性度或任何化學(xué)結(jié)構(gòu)的溶劑均可采用,唯一的條件是它們較易揮發(fā)。這種檢測(cè)器的靈敏度約為10~8克/毫升，因而比UV檢測(cè)器稍差。
折光儀檢測(cè)器
這一檢測(cè)器是所有LC檢測(cè)器中靈敏度最低的(約10~5克/毫升)，且只能有效地用于等強(qiáng)度展開的條件。它是三種檢測(cè)器中最便宜的，當(dāng)前的應(yīng)用主要限于制備液相色譜。
上述檢測(cè)器是最常使用的，全都具有線性響應(yīng)，能用作定量分析。填充以微粒固定相的柱子，可提供10000~20000理論塔板的效率一在此情況下， 檢測(cè)器的死體積極 端重要。如果檢測(cè)的體積很大，引起的譜帶擴(kuò)展可能妨礙實(shí)現(xiàn)柱子固有的較高效率。
因此，建議無(wú)論是UV檢測(cè)器還是折光儀檢測(cè)器，它們的檢測(cè)池體積不應(yīng)大于8微升，最好更小些(見附錄I)。
色譜儀的形式
色譜儀所取的形式，可為整機(jī)式或分開的單個(gè)積木組裝式。整機(jī)式簡(jiǎn)單，但是昂貴，且不易裝人新的或另外的設(shè)備，所以它是有限制的。積木式色譜儀需要一個(gè)貯槽、泵、注樣頭和柱，檢測(cè)器及其附屬電子設(shè)備，還有記錄儀。這樣一個(gè)連結(jié)起來(lái)的系.
統(tǒng)，就是一臺(tái)非常靈便的色譜儀，使能快速有效地裝入不同的或新的裝置。對(duì)這種系統(tǒng)的一個(gè)謬誤的印象是它的組裝需要有儀器制造的知識(shí)。事實(shí)上，只要求化學(xué)家連結(jié)和擰緊半打的Swege接頭或類似的接頭以使之運(yùn)轉(zhuǎn)。
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