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用焦棓酚羧酸和硫酸的試驗(yàn)法
       在有過(guò)量濃硫酸存在下，將乙醛酸（Ⅰ）和焦棓酚羧酸（Ⅱ）并合一起，就有藍(lán)色出現(xiàn)。這個(gè)反應(yīng)對(duì)乙醛酸是有特效性的，其化學(xué)原理尚未明了?？赡芎鸵掖妓?、乳酸及甘油酸的試驗(yàn)法相似，系由乙醛酸的醛基直接參與而發(fā)生醛-酚的縮合作用。

       由于醛類(lèi)和酚類(lèi)的縮合作用，往往發(fā)生于酚的OH基團(tuán)的鄰位，可能在乙醛酸的事例中，也是OH基團(tuán)和乙醛酸的COOH基團(tuán)的酐化作用而產(chǎn)生酚酯。這個(gè)酚酯的形成，在強(qiáng)烈顯色效應(yīng)中起著作用的假設(shè)，為丙醛、丁醛、異丁醛、異戊醛及芳族諸醛反應(yīng)后，僅能發(fā)生黃色的事實(shí)所支持。而甲醛及丙烯醛則發(fā)生橙色的顯色作用。
       中草酸〔HO2C－CO－CO2H?H2O或HO2C－C（OH）2－CO2H〕的性行和乙醛酸相似，系由于被濃硫酸分解而成為碳酸與乙醛酸：

HO2C－C（OH）2－CO2H → H2O+CO2+OCH－COOH

同理，二羥基酒石酸也會(huì)發(fā)生反應(yīng)。
       操作手續(xù)    將試料一滴在一微量試管中，用固體焦棓酚羧酸少許及濃硫酸一二滴處理。試管沒(méi)入水中，以使混合物冷卻，并再加入硫酸0．2－0．7毫升。然后將混合物保持于40°的溫水中約30分鐘，如出現(xiàn)暗藍(lán)——淡藍(lán)色，即示正反應(yīng)。
       鑒定限度：1微克  乙醛酸
       下列化合物的溶液，將示出：
       無(wú)反應(yīng)：阿拉伯糖、右旋糖、蔗糖、脲、馬尿酸、阿脲、雙阿脲、尿囊素、尿嘧啶（2，6－嘧啶二酮）、尿酸、二苯胺、乙醇酸、乳酸、α－及β－羥基丁酸、異丁酸、甘油酸、葡糖酸、丙酮酸、乙酰丙酸、草酸、丙二酸、丙醇二酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、鄰－，間－，對(duì)－羥基苯（甲）酸、原兒茶酸。
       黃色：葡糖醛酸。
       橄欖綠色：左旋糖

轉(zhuǎn)化成乙醇酸的試驗(yàn)法
       初生態(tài)的氫可使乙醛酸還原成乙醇酸：

OCHCOOH+2H0 → CH2(OH)COOH

而用2，7－二羥萘的靈敏試驗(yàn)法來(lái)作出檢定。在本試驗(yàn)法主要步驟的還原作用之前，必須保証無(wú)乙醇酸存在。草酸也會(huì)被初生態(tài)氫還原成乙醇酸。為了先要試驗(yàn)草酸及必要時(shí)除去草酸，試液應(yīng)用硫酸鈣飽和溶液數(shù)滴處理，以沉淀出草酸鈣（用醋酐加熱片刻，可以完全分解（脫水）草酸及甲酸。在分析中，用這個(gè)性行來(lái)消除這些酸類(lèi)，卻尚未研究過(guò)），再在濾液或離心液中使乙醛酸還原成乙醇酸。
       操作手續(xù)    試液一滴在微量試管中用1N硫酸一滴及鎂粉少許處理。金屬鎂溶解后，加入試劑二毫升，并將試管置沸水內(nèi)15～20分鐘。如有乙醛酸存在，將有紅至紫色出現(xiàn)。
       試劑：2，7－二羥萘0．01克溶于100毫升濃硫酸中。
       鑒定限度：0．5微克  乙醛酸

用苯肼及氧化劑的試驗(yàn)法
       乙醛酸和苯肼在無(wú)機(jī)酸存在下一起溫?zé)?，然后將氧化劑（氰鉄酸鉀、堿金屬的過(guò)硫酸鹽、過(guò)氧化氫等）加到已冷卻的混合物中，會(huì)有紅色出現(xiàn)。這個(gè)反應(yīng)的歷程尙未明了。假定為苯肼參加了兩個(gè)反應(yīng)，即形成乙醛酸-苯腙（Ⅰ）如方程式（1）所示，及苯肼經(jīng)過(guò)氧化劑的作用轉(zhuǎn)化為重氮鹽（Ⅱ），如方程式（2）所示，似尙合理：

紅色的水溶化合物有可能是（Ⅰ）和（Ⅱ）偶合的產(chǎn)物，具有偶氮化合物的結(jié)構(gòu)：

       苯肼和氧化劑的顯色反應(yīng)，對(duì)乙醛酸似乎具有特效性。甘油酸、草酸、酒石酸、檸檬酸、丙二酸及扁桃酸在苯肼及過(guò)氧化氫（或其它氧化劑）的混合物中不起變化。另一方面，在試驗(yàn)的條件下，乙醇酸也很有可能由于可氧化成乙醛酸而發(fā)生同樣的反應(yīng)：

CH2OHCOOH+O → CHOCOOH+H2O

下面的事實(shí)可以加強(qiáng)這一假設(shè)，即草酸溶液在被鋅及鎂還原后，肯定會(huì)含有乙醇酸，因此乙醛酸試驗(yàn)法施用于這樣處理后的草酸溶液時(shí)，才會(huì)呈正反應(yīng)。
       操作手續(xù)    待試物的無(wú)機(jī)酸溶液一滴及新配的1％鹽酸苯肼溶液一滴放在滴試板的凹處，滴試板保持在110°下五分鐘。然后加入濃鹽酸及10％（體積）過(guò)氧化氫各一滴于已冷卻的反應(yīng)混合物中，立即出現(xiàn)紅色至粉紅色，其色決定于試樣中乙醛酸的含量。
       鑒定限度：1微克  乙醛酸