用對(duì)-羥基聯(lián)苯和硫酸檢測(cè)乳酸的試驗(yàn)法
乳酸和濃硫酸一起溫和地溫?zé)?,就?huì)分解成乙醛和甲酸;甲酸立即分裂:
CH3CH(OH)COOH → CH3CHO+HCOOH(→ H2O+CO)
乙醛和對(duì)-羥基聯(lián)苯(Ⅰ)反應(yīng),可能由于在OH基團(tuán)的鄰部位上發(fā)生縮合,而形成二-(對(duì)-羥基聯(lián)苯基)乙烷(Ⅱ):
在硫酸溶液中,(Ⅱ)會(huì)緩緩地氧化成未知結(jié)構(gòu)的紫色產(chǎn)物。所以現(xiàn)在的試驗(yàn)法和利用2,7-二羥萘檢定乙醇酸相似,也牽涉到醛-酚反應(yīng),其中濃硫酸作用為縮合劑與氧化劑。事實(shí)上,介(乙)醛(四聚乙醛)、仲(乙)醛(三聚乙醛)、丁間醇醛及丙醛和對(duì)-羥基聯(lián)苯與硫酸反應(yīng),都和乙醛類(lèi)似,會(huì)產(chǎn)生深紫色產(chǎn)物。對(duì)-羥基聯(lián)苯和甲醛成藍(lán)-綠色,和丁醛成紅色,和庚醛成橙色。所以α-羥基丁酸和丙酮酸,都發(fā)生與乳酸同樣的顯色反應(yīng)。
操作手續(xù) 試液一滴和濃硫酸1毫升放入一干試管中,置于水浴內(nèi),在85°加熱2分鐘。放在自來(lái)水龍頭下冷卻至28°后,加入固體對(duì)-羥基聯(lián)苯一撮,再將混合物攪拌數(shù)次,放置10至30分鐘,將會(huì)逐漸出現(xiàn)紫色。過(guò)了一些時(shí)其色加深。
鑒定限度:1.5微克 乳酸
用鄰-羥基聯(lián)苯和硫酸檢測(cè)乳酸的試驗(yàn)法
乳酸和濃硫酸一起加熱所形成的乙醛,也可由其和鄰-羥基聯(lián)苯所發(fā)生的藍(lán)色螢光來(lái)作出檢定。甲醛、介(乙)醛、仲(乙)醛、及其次醛系高級(jí)同系物的性行,都類(lèi)似乙醛。丙酮酸不發(fā)生干擾。螢光反應(yīng)的化學(xué)根據(jù)尚未知道。
操作手續(xù) 試液一滴與結(jié)晶鄰-羥基聯(lián)苯一粒及濃硫酸0.5~1毫升在一試管中混和,置水溶中,在85℃加熱2分鐘。然后將試管對(duì)著黑紙檢視其藍(lán)色螢光。
鑒定限度:1微克 乳酸
用間-萘二酚和硫酸檢測(cè)甘油酸的試驗(yàn)法
甘油酸(Ⅰ)的水溶液和含少許溶解間-萘二酚(Ⅱ)的濃硫酸共熱,呈現(xiàn)強(qiáng)度的藍(lán)色。
這個(gè)顯色反應(yīng)的化學(xué)原理尙未明了,可能視同乙醇酸及乳酸的醛-酚反應(yīng)。其酯類(lèi)的性行與單體醇酸相似。
乙醇酸及甘氨酸在這個(gè)反應(yīng)中產(chǎn)生棕色;乳酸、α-羥基丁酸、β-羥基丁酸、赤酮酸(三羥基丁酸)、葡糖酸、乙醛酸、丙酮酸、乙酰丙酸、蘋(píng)果酸、糖質(zhì)酸、檸檬酸、中草酸及二羥基酒石酸在試驗(yàn)條件下都無(wú)反應(yīng)。丙醇二酸及奎尼酸產(chǎn)生綠色;葡糖醛酸產(chǎn)生黃的顏色與綠色的螢光;酒石酸綠到藍(lán)綠色;蘋(píng)果酸黃的顏色與藍(lán)色的螢光。
操作手續(xù) 試液一滴與試劑溶液0.75毫升混和,并在90℃水浴中加熱30至50分鐘,將有藍(lán)色出現(xiàn);藍(lán)色的深淺,視甘油酸存在量而定。
試劑:間-萘二酚0.01克溶于96%硫酸100毫升中。
鑒定限度:10微克 甘油酸