標(biāo)準(zhǔn)曲線法又稱校準(zhǔn)曲線法,做法是將貯備標(biāo)準(zhǔn)液稀釋成標(biāo)準(zhǔn)系列,用去離子水將儀器調(diào)零后,依次由稀到濃吸噴標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品溶液,測(cè)定吸光度。在坐標(biāo)紙上繪制吸光度-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線(兩者成線性關(guān)系),在曲線上內(nèi)插試樣溶液的吸光度,即可求得試樣溶液的濃度。見(jiàn)圖14-6。
若標(biāo)準(zhǔn)溶液與試樣溶液基本成分(基體)差別較大,則在測(cè)定中引入誤差。因而標(biāo)準(zhǔn)溶液與試樣溶液所加的試劑應(yīng)一致。在測(cè)定過(guò)程中要吸噴去離子水或空白溶液,以校正基線(零點(diǎn))的漂移。由于燃?xì)饬髁康淖兓蚩諝饬髁孔兓鸬奈鼑娝俾首兓?,?huì)引起測(cè)定過(guò)程中標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率發(fā)生變化。因而在測(cè)定過(guò)程中,要用標(biāo)準(zhǔn)溶液檢查測(cè)試條件有沒(méi)有發(fā)生變化,以保證在測(cè)定過(guò)程中標(biāo)準(zhǔn)溶液及試樣溶液測(cè)試條件完全一致。
吸收定律 A=Kc決定了吸光度與濃度成線性關(guān)系。目前儀器表頭多以吸光度分度表示(有對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換檔),吸光度分度是均勻刻劃的。但早期的原子吸收分光光度計(jì)是以透過(guò)率均勻刻劃的,此種表頭吸光度的讀數(shù)是不均勻刻劃的。吸光度和透過(guò)率的換算關(guān)系是:
A=2-logT
式中 A——吸光度;
T——透過(guò)率。
原子吸收測(cè)定中標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)具有適當(dāng)?shù)臐舛确秶?。一般說(shuō)來(lái)吸光度值在0~0.5之間較為合適。試樣讀數(shù)應(yīng)在據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的中段。若濃度太高或太低,可采用降低或提高靈敏度的各種方法,也可使用儀器的標(biāo)尺擴(kuò)展或衰減檔。
另外,有些元素的工作曲線明顯彎曲,例如鐵、鈷、鎳、等。一般元素的工作曲線在濃度增大時(shí)也產(chǎn)生彎曲。明顯的彎曲可通過(guò)減小光譜通帶(狹縫),減小燈電流來(lái)改善。必要時(shí)也可通過(guò)儀器上曲線校直設(shè)備,將工作曲線校直。
標(biāo)準(zhǔn)加入法的做法是在數(shù)份樣品溶液中加入不等量的標(biāo)準(zhǔn)溶液,然后按照繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的步驟測(cè)定吸光度,繪制吸光度-加入濃度曲線,用外推法求得樣品溶液的濃度。例如某樣品含銅量為cx,將此樣品1克溶解,配制成100毫升樣品溶液,分別吸取該溶液10毫升于4個(gè)100毫升的容量瓶里(如圖14-7(1)所示),再分別加入100微克、200微克、300微克及0微克銅,稀釋至標(biāo)線,搖勻。測(cè)定各瓶溶液的吸光度,按圖14-7(2)繪制吸光度-加入濃度曲線外推與橫坐標(biāo)相交,得到樣品溶液銅濃度為1.5微克/毫升。則1克樣品中銅含量為1500微克,即該樣品含銅量為0.15%。
標(biāo)準(zhǔn)加入法應(yīng)用于未知樣品分析時(shí),方便、可靠,能夠消除一些基體成分對(duì)測(cè)定的干擾。但是當(dāng)成分復(fù)雜、干擾嚴(yán)重時(shí),還應(yīng)當(dāng)通過(guò)其它方法證實(shí)能否用標(biāo)準(zhǔn)加入法得到可靠的結(jié)果,尤其在測(cè)定鈣等易產(chǎn)生于擾的元素時(shí)。
由標(biāo)準(zhǔn)加入法的做法可知,對(duì)試樣中未知元素的含量要預(yù)測(cè)其粗略含量,加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液要與樣品濃度接近,才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。
在工作曲線線性良好的情況下,也可以用加入一點(diǎn)的方法,計(jì)算求得樣品溶液的濃度。若cx為樣品溶液濃度、c0為加入標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,測(cè)得各自吸光度分別為Ax及A0+x,則
cx=Ax/(A0+x-Ax)·c0
當(dāng)試樣量有限而分析元素含量較少時(shí),可采用簡(jiǎn)易的加入法或稱“追加法”。具體做法如下:
(1)將試樣溶液移入容量瓶或刻度比色管中,稀釋至標(biāo)線,搖勻。吸噴該溶液1毫升,記取吸光讀數(shù)。這相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)加入法的第一點(diǎn)。
(2)將待測(cè)元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液1毫升加入到第一次吸噴剩下的溶液中,搖勻。進(jìn)行吸噴,并使溶液消耗為1毫升,記取吸光讀數(shù)。這相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)加入法的第二點(diǎn)。
(3)用上述同樣操作記取第三點(diǎn)及第四點(diǎn)讀數(shù)。
用吸光度對(duì)加入濃度作圖,與濃度軸相交的點(diǎn)即為試樣中待測(cè)元素的濃度。
除追加法外還可用“稀釋法”:取一濃度為,吸光讀數(shù)為A1的標(biāo)準(zhǔn)溶液V1,加入濃度為c2的未知溶液V2,測(cè)定吸光讀數(shù)為A2,則
c2=c1[A2(V1+V2)-A1V1]/A1V2
在標(biāo)準(zhǔn)曲線為直線的濃度范圍內(nèi),應(yīng)用儀器的標(biāo)尺擴(kuò)展檔,或濃度直讀裝置,用標(biāo)準(zhǔn)溶液把指示值調(diào)到相應(yīng)的濃度值。例如將2微克/毫升的標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光讀數(shù)調(diào)整為2.00,此時(shí)再吸噴試樣時(shí),讀數(shù)就是該溶液的濃度值。用此法時(shí)省去了繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線等手續(xù),分析速度快。應(yīng)用此法時(shí)要用標(biāo)準(zhǔn)溶液反復(fù)校準(zhǔn),以取得準(zhǔn)確結(jié)果。并要將同一樣品進(jìn)行2~3次讀數(shù),求平均值。