吸收光譜的定性分析方法
實(shí)驗(yàn)室k / 2019-07-15
在可見(jiàn)光區(qū)和紫外線(xiàn)區(qū)以吸收光譜做定性或定量時(shí),主要根據(jù)不同物質(zhì)在光譜上具有一些特征性吸收來(lái)進(jìn)行測(cè)定的。這些特征有最大吸收波長(zhǎng)、肩峰、吸光系數(shù)和吸收度比值等,這些數(shù)據(jù)被稱(chēng)為某物質(zhì)的特征性(物理)常數(shù)。測(cè)定樣品所得的特征性常數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)品的特征性常數(shù)值進(jìn)行嚴(yán)格對(duì)照,根據(jù)二者的一致性,可做為初步定性分析。要測(cè)得這些數(shù)據(jù)需要較精密準(zhǔn)確的儀器。從儀器的精度及其所適應(yīng)吸收光譜的波長(zhǎng)范圍等方面來(lái)看,581-G型光電比色計(jì)、72型及721型分光光度計(jì)均不適于對(duì)物質(zhì)做定性分折用。751型分光光度計(jì)使用波長(zhǎng)范圍廣、精度高,可以用來(lái)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析測(cè)定。特別是利用751分光光度計(jì)對(duì)物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)λ最大和吸光系數(shù)ελ及E1cm1%·λ等特征常數(shù)的測(cè)定,常做為定性分析的依據(jù)。
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分析方法如下:
1.對(duì)照光譜曲線(xiàn)的一致性進(jìn)行初步定性分析 如果樣品與標(biāo)準(zhǔn)品是同一種化合物的話(huà),它們的吸收光譜曲線(xiàn)也必然完全一致。使被測(cè)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品兩溶液在條件完全相同條件下,分別測(cè)定它們的吸收光譜曲線(xiàn),比較對(duì)照二者是否一致。如無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),可參考標(biāo)準(zhǔn)圖譜,并與之比較,二者吸收光譜曲線(xiàn)一致時(shí),可初步定性是同一物質(zhì)。吸收光譜曲線(xiàn)的做法是以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo),以吸收度A或吸光系數(shù)ελ或lgελ為縱坐標(biāo)作圖。如以資料中的光譜曲線(xiàn)做標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照時(shí),樣品液也必須按照標(biāo)準(zhǔn)圖譜條件規(guī)定的要求去做,測(cè)得結(jié)果再與標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照定性。
例如,根據(jù)測(cè)定,繪制合成維生素A2(實(shí)線(xiàn))與天然維生素A2(虛線(xiàn))的紫外吸收光譜曲線(xiàn)圖(圖13-20)。它們所用溶劑與所配濃度都相同,二者的紫外吸收光譜圖完全一致,說(shuō)明合成的維生素A2和天然品是相當(dāng)?shù)摹?/span>
為了進(jìn)一步確證,有時(shí)可改換一種溶劑,分別再測(cè)定吸收光譜曲線(xiàn)進(jìn)行比較。還可采取改換其它條件,使標(biāo)準(zhǔn)品與樣品在新條件下進(jìn)行測(cè)定并繪圖比較,如果二者光譜圖仍相一致,即可做進(jìn)一步定性確證。
2.對(duì)照比較“吸收度比值或吸光系數(shù)比值”進(jìn)行定性分析 有的物質(zhì)其光譜中吸收峰較多,可以將幾個(gè)吸收峰處的吸收度A的比值或吸光系數(shù)的比值做為定性依據(jù)。因?qū)υ撐镔|(zhì)來(lái)說(shuō),其各自峰值的最大吸收波長(zhǎng)λ最大是一定的,那么它們的吸收度比值或吸光系數(shù)的比值也必然是一定的,并為其特征性之一。例如維生素B12的吸收光譜圖上有三個(gè)吸收峰,分別是278、361及550nm,它們的吸光系數(shù)E1cm1%λ或吸收度A的比值為:
如某被鑒定樣品,測(cè)得吸收峰的數(shù)目和峰值波長(zhǎng)與以上278、361及550nm近似,且它們的吸光系數(shù)比值(或吸收度A的比值)都在所定的范圍之內(nèi),則可考慮樣品結(jié)構(gòu)基本與標(biāo)準(zhǔn)維生素B12相同。