分光光度測(cè)定的新技術(shù)導(dǎo)數(shù)分光光度法
實(shí)驗(yàn)室k / 2019-07-23
導(dǎo)數(shù)分光光度法是對(duì)吸收曲線進(jìn)行簡單的微分處理，即可得到吸光度對(duì)波長的變化率曲線(dA/dλ-λ)，這一曲線稱之為導(dǎo)數(shù)吸收光譜。
對(duì)吸收曲線進(jìn)行微分處理，實(shí)質(zhì)上即是測(cè)定在整個(gè)區(qū)域內(nèi)這一曲線的斜率。吸收曲線上的最大吸收對(duì)應(yīng)于偶數(shù)階導(dǎo)數(shù)光譜的極值(即最大值或最小值)，而在奇數(shù)階導(dǎo)數(shù)光譜中則對(duì)應(yīng)于零(圖12-26)。由圖12-26可知，隨著導(dǎo)數(shù)階數(shù)的增加，吸收帶寬變窄，峰形變銳，從而提高了光譜的分辨率。
應(yīng)用導(dǎo)數(shù)分光光度法對(duì)于分析混濁試樣；微量成分的檢測(cè)；樣品純度的檢驗(yàn)；背景扣除及多組分混合物重疊光譜的分離與測(cè)定等方面，均具有特殊的作用。
導(dǎo)數(shù)光譜可利用雙波長分光光度計(jì)測(cè)得，但這并非唯一獲得試樣導(dǎo)數(shù)光譜的方法，隨著電子技術(shù)的發(fā)展，尤其是計(jì)算機(jī)在儀器上的應(yīng)用，使得有可能對(duì)信號(hào)進(jìn)行模擬微分，因此，一般用電學(xué)方法也可得到導(dǎo)數(shù)吸收光譜，并且能得到較高階的導(dǎo)數(shù)收光譜。
在定性方面，一般的吸收光譜上的肩峰或二個(gè)相互重疊的吸收峰，很難加以區(qū)分，這給光譜解析帶來了困難，若利用導(dǎo)數(shù)吸收光譜，則能很簡便地將肩峰以及相互重疊的吸收峰區(qū)別開來(圖12-27)。
導(dǎo)數(shù)分光光度法在定量分析方面的應(yīng)用，尤其是對(duì)混合物的定量，有其獨(dú)特的優(yōu)越性。在一定條件下(特定波長)，導(dǎo)數(shù)值dA/dλ與被測(cè)組分的濃度呈線性關(guān)系，可采用下述二法求得組分的含量(圖12-28)。
(1)切線法：將吸收曲線經(jīng)數(shù)學(xué)處理變成導(dǎo)數(shù)吸收光譜后，在二相鄰峰的極大值處作一切線(ab)，然后取中間極值作一平行于縱坐標(biāo)的直線(t)，根據(jù)測(cè)量其大小計(jì)算組分的含量。
(2)峰-谷法：對(duì)于多組分混合物中某一成分分析，常在導(dǎo)數(shù)光譜圖上測(cè)量峰頂與峰谷兩極值之間的距離(P)，從而求得其含量。
例如，乙醇中微量苯的測(cè)定：利用一般分光光度法只能檢測(cè)乙醇中的苯約50ppm左右，當(dāng)苯的含量降低到10ppm時(shí)，苯的特征吸收峰已很小，無法測(cè)量(圖12-29)，但用導(dǎo)數(shù)分光光度法則可很輕易地檢測(cè)到，若用二階導(dǎo)數(shù)光譜，可檢測(cè)到乙醇中5ppm的苯，而用四階導(dǎo)數(shù)光譜甚至可檢測(cè)到1ppm，從而大大提高了靈敏度。
.jpg "吸收光譜曲線及其第1階到第4階導(dǎo)數(shù)曲線(示意圖)")
.jpg "兩個(gè)吸收峰重疊及其第1階到第4階導(dǎo)數(shù)曲線(示意圖)")
.jpg "導(dǎo)數(shù)光譜的定量計(jì)算")
.jpg "乙醇中微量苯的定量分析")
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