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氧化鋁活度測(cè)定法(薄層色譜法)的實(shí)驗(yàn)


實(shí)驗(yàn)室k / 2019-08-08

       一、目的

       (1)掌握薄層軟板的制備方法。
       (2)熟悉薄層色譜的一般操作方法。
       (3)掌握用薄層軟板測(cè)定氧化鋁活度的方法。
       二、儀器與試劑
       (1)儀器:色譜缸(25×6.5x3cm)、玻璃板(3×20cm)、毛細(xì)管(Φ0.5mm)、量筒、玻璃棒;
       (2)氧化鋁:過(guò)180目篩的細(xì)粉(如180~220目);
       (3)四氯化碳:10ml;
       (4)五色染料:稱取偶氮苯60mg,對(duì)甲氧基偶氮苯40mg,蘇丹黃、蘇丹紅、對(duì)氨基偶氮苯各20mg,置于50ml容量瓶中,加四氯化碳(經(jīng)NaOH干燥后重新蒸餾)溶解并稀釋至刻度、搖勻。
       三、實(shí)驗(yàn)步驟
       1.氧化鋁軟板的制備——干法鋪板    將待測(cè)氧化鋁撒在潔凈的玻璃板(3×20cm)的一端(玻璃板下面可墊一張白紙),另取比玻璃板寬度稍大的玻璃管,在管的兩端各繞幾圈塑料絲,其距離即為薄層的寬度,其厚度即為薄層的厚度(以0.5~1mm為宜)。在塑料卷的外側(cè)可套上一小段橡皮圈作為固定邊,雙手均勻用力,推擠氧化鋁至玻璃板的另一端,使成一均勻平坦的薄層。
       2.點(diǎn)樣、展開    取氧化鋁薄層板一塊,距一端2.5cm處作為起始線(可用細(xì)針輕輕接觸起始線邊緣部分作為標(biāo)記,但不要戳穿)。取毛細(xì)管一根,點(diǎn)加五色染料0.02ml于起始線中點(diǎn)。在色譜槽內(nèi)放入10ml四氯化碳。將點(diǎn)好樣的氧化鋁薄層板點(diǎn)樣的一端浸入展開劑中,浸沒(méi)深度約為0.5cm,傾斜角度為15~20°。待展開劑到離起始約15cm時(shí)(約需10min)取出。觀察各染料的位置和顏色,測(cè)定比移值,根據(jù)下表確定氧化鋁的活度。
氧化鋁活度的薄層定級(jí)法

                              活度級(jí)

偶氮染料                 

偶氮苯 0.59 0.74 0.85 0.95
對(duì)甲氧基偶氮苯 0.16 0.49 0.69 0.89
蘇丹黃 0.01 0.25 0.57 0.78
蘇丹紅 0.00 0.10 0.33 0.56
對(duì)氨基偶氮苯 0.00 0.03 0.08 0.19
       四、注意事項(xiàng)
       (1)鋪板時(shí),用力要均勻,推移不宜過(guò)快,也不能中途停頓或來(lái)回反復(fù),否則厚薄不均勻。
       (2)軟板薄層硫松,很不牢固,稍受震動(dòng)或經(jīng)風(fēng)吹就會(huì)把薄層破壞,因此在點(diǎn)樣、展開、顯色等操作中都要特別小心。
       (3)點(diǎn)樣要輕,盡量避免出坑;操作越快越好,盡量防止吸收水分。
       (4)量筒不要混用(尤其是量水用的量筒)。
       (5)氧化鋁稱量時(shí)要快,稱后蓋嚴(yán)。
       五、思考題
       1.根據(jù)蘇丹黃及蘇丹紅結(jié)構(gòu)上的差異(極性大小),試解釋用四氯化碳作展開劑時(shí)為什么蘇丹黃的Rf值大于蘇丹紅?
       2.用氧化鋁軟板分離混合物,是屬于哪一種層析原理?
       3.制備氧化鋁軟板應(yīng)該注意哪些問(wèn)題?

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