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    此法的根據(jù)是各種物質(zhì)在不相溶混的兩種溶劑間的分配系數(shù)的差異。它是一個(gè)逆流苯取過(guò)程，層析結(jié)果決定于溶質(zhì)在移動(dòng)相（有機(jī)溶劑）和固定相（由惰性材料支持體如硅酸凝膠所保持的水溶液）之間的分配。

    當(dāng)流動(dòng)相順支持劑（或叫“載體”）下流時(shí)，流動(dòng)相和固定相不斷接觸，溶質(zhì)就在兩相之間發(fā)生分配過(guò)程。由于各種物質(zhì)分配系數(shù)不同，分配系數(shù)較大的物質(zhì)（在固定相水中較易溶解）集中在柱的上端，反之，分配系數(shù)較小的物質(zhì)則集中在柱的下端，因而分成不同的層。在層析中常用比移值R_f來(lái)表示物質(zhì)在支持劑中移的動(dòng)速率（圖6－2）當(dāng)溶質(zhì)層移動(dòng)到柱的底部G時(shí)，溶劑前緣到達(dá)F：

R_f＝溶質(zhì)的移動(dòng)速率/溶劑的移動(dòng)速率=OG/OF=OG/(OG+GF)

R_f值不僅隨物質(zhì)的分配系數(shù)而變，而且和層析柱的裝置有關(guān)，因此層析柱中支持體的用量和松緊程度都要一致。根據(jù)R_f值可作定性分析。
    R_f值相差較大的物質(zhì)可用分配層析法分離。