福林酚
中文名稱:福林酚英文名稱:Folin reagent別稱:福林試劑規(guī)格 100ML化學(xué)特性福林酚是多種化合物配制成的混合物,一種能與酚羥基呈色的磷鉬酸-磷鎢酸試劑??膳c蛋白質(zhì)分子中酪氨酸殘基作用生成深藍(lán)色化合物。在勞里法蛋白質(zhì)定量中也使用該試劑。無(wú)色至淡黃色液體,試劑中的 W6+ 在堿性條件下,與體系中存在的酚羥基發(fā)生反應(yīng),得到呈現(xiàn)藍(lán)色的W5+。福林酚(Lowry)法系依據(jù)蛋白質(zhì)分子中含有的肽鍵在堿性溶液中與Cu2+螯合形成蛋白質(zhì)-銅復(fù)合物,此復(fù)合物使酚試劑的磷鉬酸還原,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,同時(shí)在堿性條件下酚試劑易被蛋白質(zhì)中的酪氨酸、酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸還原呈藍(lán)色反應(yīng)。在一定范圍內(nèi)其顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度呈正比,以蛋白質(zhì)對(duì)照品溶液作標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用比色法測(cè)定供試品中蛋白質(zhì)的含量。該法靈敏度高,測(cè)定范圍通??蛇_(dá)20~250μg。其中福林試劑是該檢測(cè)方法中最關(guān)鍵的試劑。福林試劑的制備在中國(guó)藥典2015年版四部中有收載,目前也有市售產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)室自制福林試劑步驟繁瑣,過(guò)程復(fù)雜,制備所得的試劑質(zhì)量無(wú)法保證。而福林試劑的其中福林試劑是該檢測(cè)方法中最關(guān)鍵的試劑。而福林試劑的市售品較容易獲得。蛋白質(zhì)或多肽分子中有帶酚基酪氨酸或色氨酸,在堿性條件下,可使酚試劑中的磷鉬酸化合物還原成藍(lán)色(生成鉬藍(lán)和鎢藍(lán)化合物)。藍(lán)色的深淺與蛋白質(zhì)的含量成正比, 可用比色法測(cè)定。蛋白酶活力測(cè)定一般采用酪蛋白(干酪素,酪素)為底物,在一定的水解條件下生成氨基酸,其活力用生成酪氨酸的量表示,而酪氨酸量采用福林—酚試劑法測(cè)定.福林—酚試劑系磷鉬酸鹽與磷鎢酸鹽的雜多酸溶液,在堿性條件下易被酪氨酸中酚基還原,生成鉬蘭與鎢蘭,用比色法測(cè)定. 本文對(duì)酶的浸取,水解條件及比色條件進(jìn)行了試驗(yàn),目的是進(jìn)一步了解蛋白酶活力測(cè)定中影響因素,使方法的重復(fù)性更好,準(zhǔn)確度更高.
產(chǎn)品用途福林酚用作化驗(yàn)分析,蛋白質(zhì)含量的測(cè)定,蛋白質(zhì)分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等)與福林酚反應(yīng),生成深藍(lán)色復(fù)合物,藍(lán)色的深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。適用于對(duì)體系中存在酚羥基化合物其含量的比色法、分光光度法。
測(cè)定方法將1ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液和5ml0.025mol/lPH7.5的磷酸緩沖液加入試管中,在40℃保溫10min,迅速加入1ml酶液,保溫15min后加入3ml10%的三氯乙酸中止反應(yīng)。取濾液1ml加入0.55M的碳酸鈉溶液5ml和福林試劑0.5ml,40℃水浴10min顯色,在OD680處比色。
生產(chǎn)方法向2000mL的磨口回流瓶中加入100g鎢酸鈉(Na2WO2·2H2O)、25g鉬酸鈉及700mL的去離子水,再加入50mL85%的磷酸及濃鹽酸l00mL,充分混合后,接上回流冷凝管,以小火回流10h,結(jié)束后再加入50g的硫酸鋰(Li2SO4)、50mL去離子水及數(shù)滴液溴,再繼續(xù)沸騰15min,以驅(qū)除過(guò)量的溴,冷卻后濾液呈黃綠色(如仍呈綠色,需再重復(fù)滴加溴水的步驟),加去離子水定容至1000mL,過(guò)濾,濾液置于棕色試劑瓶中,貯于冰箱中可長(zhǎng)期保存?zhèn)溆?。此溶液使用時(shí)可按1:3比例用去離子水稀釋。
產(chǎn)品信息 [顏色] 無(wú)色液體 [重量] 500ml