氣相色譜在中藥及中成藥的分析應(yīng)用
實(shí)驗(yàn)室k / 2019-08-01
氣相色譜法具有高分離效能、高靈敏度、樣品用量小以及分析速度快等特點(diǎn)，在中藥及中成藥方面的分析應(yīng)用日益增多。例如生物堿、胺類、黃酮甙、香豆素，萜類、激素、有機(jī)酸及酚類等各類有效成分都可用這一技術(shù)進(jìn)行分離分析，包括定性和定量，這些化合物的特點(diǎn)是分子量大，沸點(diǎn)、熔點(diǎn)都很高，揮發(fā)性低，面且都帶有氨基、羧基、羥基等極性基團(tuán)或者含有鹵素、硫等雜原子，這些因素給直接進(jìn)行氣相色譜分析帶來(lái)了很大的困難，經(jīng)常會(huì)造成嚴(yán)重拖尾，或被吸著，或被熱分解。針對(duì)這些情況，可采用下列措施以改善分離。
(1)根據(jù)樣品的情況可選用?；?、酯化、硅烷化成引入鹵素原子等制備衍生物的方法，使原來(lái)?yè)]發(fā)性差的藥物變成一種新的揮發(fā)性較強(qiáng)的物質(zhì)，并降低其熔點(diǎn)和沸點(diǎn)；或降低原來(lái)藥物的極性，減少拖尾和吸附；或增強(qiáng)對(duì)熱的穩(wěn)定性；或改變物質(zhì)在柱上的持留性質(zhì)以改進(jìn)分離。鹵素原子的引進(jìn)，可增高其對(duì)電子抽獲檢測(cè)器的響應(yīng)值。
(2)采用高溫固定液；或?qū)d體進(jìn)行前處理，包括水洗、酸洗或堿洗、硅烷化；或涂布低含量固定液。常用的高溫固定液有：阿匹松L、OV-1、SE-30、OV-17、OV-225、XE-60、QF-1、JXR、PEG-20M等。低涂布量固定液的范圍在1～5％之間，含量太低常易造成涂布不勻，而且大大降低了進(jìn)樣量。
(3)為避免樣品在汽化室受熱分解，常采用柱頭直接進(jìn)樣。為減少死體積，使柱出口與檢測(cè)器相接。
(4)色譜柱以經(jīng)硅烷化的玻璃柱為最佳，因?yàn)樗哂凶钚〉奈胶妥畹偷拇呋钚?。不銹鋼柱雖也可用，但對(duì)某些物質(zhì)會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重拖尾或分離不佳。
某些中藥中揮發(fā)性成分的氣相色譜分析
氣相色譜法是分析揮發(fā)油類組分的有力工具。除了利用已介紹過(guò)的各種定性、定量方法進(jìn)行分析測(cè)定外，還可通過(guò)制備色譜法收集餾分，然后再配合其他分析方法進(jìn)行鑒定；也可直接用GC-MS聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析測(cè)定。
具有揮發(fā)性組分的中藥極多，象薄荷、桂皮、細(xì)辛、魚(yú)腥草、野菊花、麝香、冰片、石菖蒲……等?，F(xiàn)略舉二例供參考。
1.中藥冰片中主要成分的氣相色譜分析 冰片是一味常用中藥，例如搶救性的中成藥安宮牛黃丸、至寶丹、蘇合香丸、麝香保心丸，以及家庭常備的藥物人丹等都含有冰片。冰片中的主要成分為龍腦、異龍腦和樟腦，現(xiàn)用氣相色譜法可方便而正確地測(cè)定各組分的含量，并作為藥物的鑒定指標(biāo)(圖15-14)。
龍腦、異龍腦和樟腦三個(gè)組分，在弱極性固定液上很難分開(kāi)，例如SE-52和DC-200等柱的分離效果很差，而極性較強(qiáng)的PEG-20M柱，能獲滿意的分離效果，見(jiàn)圖15-14。色譜分離條件為：玻璃柱內(nèi)徑3mm，柱長(zhǎng)2.1m；柱溫140℃；N2為載氣，流速30ml/min；氫火焰離子化檢測(cè)器。儀器為GC-R1A(日本島津公司)。
2.乳香揮發(fā)油的分析 乳香是一味具有止痛、消腫、去腐、生肌功效的中藥，揮發(fā)油的含量約占5～7％。乳香一般是經(jīng)過(guò)炒后去油再作藥用的，但從目前的藥理研究來(lái)看，乳香揮發(fā)油具有較強(qiáng)的抗菌消炎作用，其中的主要成分為乙酸辛酯，其他的成分為辛醇、α-蒎烯、β-蒎烯、桉葉素、乙酸十二酯、十二醇等。其氣相色譜圖見(jiàn)圖15-15。儀器為GC-R1A(日本島津公司)。色譜條件：載氣為N2，流速為30ml/min；柱溫為程序升溫100～160℃，升溫速率2℃/min，最后在160℃；停留30min。
中成藥的氣相色譜分析
近年來(lái)，以氣相色譜數(shù)據(jù)作為藥物定性定量依據(jù)的情況日益增多，并收入各國(guó)的藥典。利用色譜技術(shù)來(lái)鑒定中成藥中某些主要成分是極為有益的。例如復(fù)方柴胡注射劑、清涼油、人丹、麝香保心丸、蘇合香丸、消痔錠……等，現(xiàn)也舉二例說(shuō)明之。
1.復(fù)方柴胡注射劑的質(zhì)控研究 復(fù)方柴胡注射劑主要是由柴胡和細(xì)辛兩味中藥的揮發(fā)油配制而成。所含的對(duì)-甲氧基苯乙酮、丁香酚、己酸、戊酸、甲基丁香酚、黃樟醚、桉葉素、α-蒎烯、β-蒎烯等組分具有抗菌、解熱、鎮(zhèn)痛等作用，是臨床上治療感冒等上呼吸道感染所引起的疾病的常用藥。氣相色譜的分析可為注射劑的質(zhì)量控制提供指標(biāo)，從而可避免因注射劑中所含組分的組成不穩(wěn)定而導(dǎo)致臨床療效不穩(wěn)定。此外，色譜圖還指出了黃樟醚(致癌物質(zhì))的存在，見(jiàn)圖15-16峰5。根據(jù)氣相色譜分析結(jié)果，為保障人民的健康，有關(guān)的生產(chǎn)單位已對(duì)該注射劑的配方作了修改。
2.清涼油主要成分的氣相色譜分析 清涼油屬于家庭常備藥物之一，主要由薄荷、樟腦、丁香、桂皮、桉葉素等含揮發(fā)性成分的中藥組成。若用氣相色譜法進(jìn)行分析，則可清楚地測(cè)出其所含的主要成分及它們的總揮發(fā)油含量，分析結(jié)果見(jiàn)圖15-17。
色譜條件：玻璃柱2.1m×3mm；固定液PEG-20M；載氣為N2，流速30ml/min；柱溫為程序升溫80～160℃，升溫速率2℃/min；氫火焰離子化檢測(cè)器；儀器GC-R1A。
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.jpg "乳香的氣相色譜圖")
.jpg "復(fù)方柴胡注射劑批號(hào)790825的GC譜圖")
.jpg "清涼油主要成分的氣相色譜圖")
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