雙波長分光光度法測定安鈉咖注射液中咖啡因的含量
實驗室k / 2019-08-07
一、目的
(1)理解雙波長法測定藥物含量的原理。
(2)掌握在單波長分光光度計上用雙波長法測定藥物制劑含量的原理和方法。
二、提要
(1)雙波長法是根據(jù)待測溶液在兩個適當(dāng)波長的吸收值之差與待測組分濃度成正比關(guān)系的定量方法。
(2)在無背景干找下，測定二元組分中一組分的計算公式為：
△A=(aλ1－aλ2)·c·L
式中：△A為混合物在λ1和λ2波長吸收度之差；λ1、λ2為干擾組分等吸收波長，亦為被測組分的測定波長；aλ1、aλ2為被測組分在λ1和λ2的吸光系數(shù)(用標(biāo)準(zhǔn)品測得)；c為被測組分的濃度；L為吸收池厚度。
三、儀器與試劑
(1)可見-紫外分光光度計：751型或751(G)型等；
(2)容量瓶：100ml2個、250ml2個、50ml1個、500ml1個、10ml3個；
(3)刻度吸管：10ml3支；
(4)安鈉咖注射液樣品，每1ml中含無水咖啡因0.12g、苯甲酸鈉0.13g，藥典規(guī)定均應(yīng)為標(biāo)示量的93～107.0％；
(5)咖啡因標(biāo)準(zhǔn)液：精密稱取咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品0.1g，置100ml容量瓶中，加水至刻度，再精密量取2.5ml此溶液于250ml容量瓶中，加水稀釋至刻度；
(6)苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液：精密稱取苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品0.1g，置于100ml容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，精密量取5ml于50ml容量瓶中，用水稀釋至刻度。
四、步驟
1.樣品制備 精密量取安鈉咖注射液2.5ml于250ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，再精密量取此液5ml，置于500ml容量瓶中，用水稀釋至刻度。
2.測定
(1)咖啡因紫外吸收光譜的描繪：吸取咖啡因標(biāo)準(zhǔn)液1ml，于10ml容量瓶中并加水至刻度，取稀釋液于石英吸收池中，以水為空白液，測定不同波長的吸光度并繪吸收曲線。
(2)苯甲酸鈉紫外吸收光譜的描繪：吸取苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液1ml，于10ml容量瓶中加水至刻度，取稀釋液于石英吸收池中，以水為空白，測定不同波長下的吸光度并繪制吸收曲線。
(3)等吸收波長的選擇：從苯甲酸鈉吸收光譜圖上找出等吸收波長λ1和λ2。
(4)測定標(biāo)準(zhǔn)咖啡因溶液在λ1和λ2的吸光度。
(5)樣品中咖啡因含量的測定：取安鈉咖樣品液1ml于10ml容量瓶中，加水至刻度，以水為空白，測定其在λ1和λ2處的吸光度。
五、計算
△A=△acL
△A樣/△A標(biāo)=△ac樣L/△ac標(biāo)L=c樣/c標(biāo)
以標(biāo)示量表示安鈉咖中咖啡因的含量
S％=c樣×稀釋倍數(shù)/標(biāo)示量×100％
六、思考題
1.用單波長分光光度計進(jìn)行雙波長法測定，應(yīng)決定哪些條件?
2.怎樣選擇等吸收波長?
![2,2-雙[4-(4-氨基苯氧基苯)]六氟丙烷](images/202103/thumb_img/3458_thumb_G_1615773264954.jpg)
.jpg "雙波長分光光度法")
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