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 肌苷酸二鈉

中文名稱(chēng)    肌苷酸二鈉

中文同名    肌苷酸鈉;5ˊ-肌苷酸二鈉鹽

英文名稱(chēng)    Disodium 5'-Inosinate

化學(xué)式       C10H11N4Na2O8P

分子量       392.17

CAS編號(hào)   4691-65-0

質(zhì)檢信息

質(zhì)檢項(xiàng)目 指標(biāo)值

灼燒殘?jiān)?以硫酸鹽計(jì))，%  ≤0.01

含量，％ ≥98.0%

PSA：195.49000

LOGP：-1.27550

密度  2.31g/cm3

沸點(diǎn)  851.4°C at 760 mmHg

熔點(diǎn)  175 °C

閃點(diǎn)  468.7°C

化學(xué)特性

肌苷酸二鈉為白色粉末，平均含7.5個(gè)分子的結(jié)晶水。無(wú)臭，有特殊滋味。味覺(jué)閾值0.012%。不潮解。熔點(diǎn)不明顯，180℃時(shí)呈褐色，230℃左右時(shí)分解。性穩(wěn)定，在一般食品加工條件下(Ph值為4～7)、100℃加熱1h無(wú)分解現(xiàn)象。水溶液呈中性，微溶于乙醇，幾乎不溶于乙醚。

產(chǎn)品用途

1.鮮味劑。如在醬油中加入5～10萬(wàn)分之一，即呈特殊鮮味。一般均與味精、鳥(niǎo)苷酸鈉等合用，以提高增鮮效果。

2.肌苷酸鈉液時(shí)國(guó)內(nèi)外允許使用的呈味劑，較少單獨(dú)應(yīng)用，常與味精一起混合使用，混用時(shí)鮮味有相乘的作用。我國(guó)規(guī)定可用于各類(lèi)飼料、食品添加劑，按生產(chǎn)需要適量使用。

3.肌苷酸鈉也是國(guó)內(nèi)外允許使用的呈味劑，單獨(dú)應(yīng)用較少，常與味精混合一起使用，混用時(shí)鮮味有相乘的作用。我國(guó)規(guī)定可用于各類(lèi)食品，按生產(chǎn)需要適量使用。

4.肌苷酸二鈉主要用于各種原因引起的白細(xì)胞減少和急慢性肝病。

5.是食品增鮮劑，其二鈉鹽與谷氨酸鈉(味精)混合使用，其呈味作用比單用味精高數(shù)倍，有“強(qiáng)力味精”之稱(chēng)。

6.適用于各種原因引起的白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥、各種心臟疾患、急性及慢性肝炎、肝硬化等，此外尚可治療中心視網(wǎng)膜炎、視神經(jīng)萎縮等。

 

儲(chǔ)藏措施

1.儲(chǔ)存于陰涼、通風(fēng)的庫(kù)房。

2.應(yīng)與氧化劑、食用化學(xué)品分開(kāi)存放，切忌混儲(chǔ)。

3.保持容器密封。

4.遠(yuǎn)離火種、熱源，防止陽(yáng)光直射。

5.庫(kù)房必須安裝避雷設(shè)備。

6.排風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)設(shè)有導(dǎo)除靜電的接地裝置。

7.采用防爆型照明、通風(fēng)設(shè)置。

8.禁止使用易產(chǎn)生火花的設(shè)備和工具。

9.儲(chǔ)區(qū)應(yīng)備有泄漏應(yīng)急處理設(shè)備和合適的收容材料。

10.防止粉塵和氣溶膠生成。

急救措施 

【食入】攝入不可能。但是，如果攝入，獲得緊急醫(yī)療照顧。

【吸入】如果克服被曝光，將受害人轉(zhuǎn)移到空氣新鮮處。給予吸氧或人工呼吸。獲得緊急醫(yī)療照顧。迅速采取行動(dòng)是至關(guān)重要的。

【皮膚】立即脫去污染的衣著。徹底清洗皮膚，用溫和的肥皂/水。W /溫水沖洗15分鐘。如果是粘的，首先使用無(wú)水清潔。尋求醫(yī)療照顧，如果不良影響或刺激。

【眼睛】眼睛接觸的情況下，立即用清水沖洗20-30分鐘。經(jīng)常收回眼皮。獲得緊急醫(yī)療照顧。

生產(chǎn)方法

肌苷酸二鈉的制備 棒狀桿菌269發(fā)酵，發(fā)酵液去菌體，吸附，洗脫，濃縮，加乙醇，pH7-7.5條件下結(jié)晶可得肌苷酸二鈉。

棒狀桿菌269[發(fā)酵]→發(fā)酵液[去菌體，吸附，洗脫，濃縮]→濃縮液[乙醇]→[pH7-7.5]肌苷酸二鈉

肌苷粗品的制備 在乙酸緩沖液中，調(diào)pH5.4-5.6，加壓137-147kPa，脫磷酸5h，可得肌苷粗品。

肌苷酸二鈉[乙酸，加壓]→肌苷

精制 蒸餾水溶解，pH=6，重結(jié)晶，可得精品。

方法二、一步發(fā)酵法

菌株選育 變異芽孢桿菌7171-9-1移接到斜面培養(yǎng)基上，30-32℃培養(yǎng)48h。斜面培養(yǎng)基成分為葡萄糖1%，蛋白胨0.4%，酵母浸膏0.7%，牛肉浸膏1.4%，瓊脂2%，在pH7、120℃滅菌20min。

變異芽孢桿菌7171-9-1[斜面培養(yǎng)]→[30-32℃, 48h]菌種斜面

種子培養(yǎng)

一級(jí)種子：培養(yǎng)基成分為葡萄糖2%，蛋白胨1%，酵母浸膏1%，玉米漿0.5%，尿素0.5%，氯化鈉0.25%。滅菌前pH 7，用1L三角瓶裝150ml培養(yǎng)基，115℃滅菌15min。每個(gè)三角瓶中接入白金耳環(huán)菌苔，在往復(fù)式搖床上，32℃±1℃培養(yǎng)18h。

二級(jí)種子：培養(yǎng)基同一級(jí)種子，放大50L發(fā)酵罐，定容體積25L，接種量 3%，32℃±1℃培養(yǎng)12-15h，攪拌速度320r/min，通風(fēng)量1：0.25V/(V·min)，生長(zhǎng)菌指標(biāo) A(650nm)=0.78，pH=6.4-6.6。菌種斜面[搖床振蕩]→[pH7, 32℃±1℃, 18h]一級(jí)種子培養(yǎng)液[50L發(fā)酵罐]→[pH6.4-6.6, 32℃±1℃, 12-15h]二級(jí)種子培養(yǎng)液

發(fā)酵 50L不銹鋼標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵罐，定容體積35L。培養(yǎng)基成分為淀粉水解糖10%，干酵母水解液1.5%，豆餅水解液0.5%，尿素0.4%，硫酸鎂0.1%，氯化鉀0.2%，磷酸氫二鈉0.5%，硫酸銨1.5%，有機(jī)硅油0.05%。pH=7，接種量0.9%，32℃±1℃培養(yǎng)93h，攪拌速度320r/min，通風(fēng)量1：0.5V/(V·min)。500L發(fā)酵罐，定容體積350L。培養(yǎng)基成分為淀粉水解糖10%，干酵母水解液1.5%，豆餅水解液0.5%，硫酸銨1.5%，硫酸鎂0.1%，氯化鉀0.2%，磷酸氫二鈉0.5%，碳酸鈣1%，有機(jī)硅油小于0.3%。pH=7，接種量7%，32℃±1℃培養(yǎng)75h，攪拌速度230r/min，通風(fēng)量1：0.25V/(V·min)。

20000L 發(fā)酵罐，培養(yǎng)基同上，接種量2.5%, 35℃±5℃培養(yǎng)83h。

二級(jí)種子培養(yǎng)液[50L發(fā)酵罐]→[pH7, 32℃±1℃, 93h]發(fā)酵液[500L發(fā)酵罐]→[pH7, 32℃±1℃, 75h]發(fā)酵液[20000L發(fā)酵罐]→[pH7, 35℃±1℃, 83h]發(fā)酵液提取、吸附、洗脫 將發(fā)酵液30-40L 調(diào)pH=2.5-3，連同菌體通過(guò)2個(gè)串聯(lián)的3.5kg 732H樹(shù)脂柱吸附。用相當(dāng)于樹(shù)脂總體積3倍的pH 3水洗1次，把兩柱分開(kāi)，用pH 3水把肌苷洗脫下來(lái)，再經(jīng)769活性炭柱吸附肌苷，先用2-3倍體積的水洗滌，再用70-80℃水洗，70-80℃，1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡30min，最后用0.01mol/L氫氧化鈉溶液洗脫肌苷，收集洗脫液，真空濃縮，pH11或6放置，過(guò)濾，得粗品。

發(fā)酵液[732樹(shù)脂柱]→[pH2.5-3]吸附物[水]→[pH2.5-3]洗脫液[769活性炭柱]→吸附物[蒸餾水，氫氧化鈉]→[70-80℃][氫氧化鈉]→[70-80℃]洗脫液[濃縮結(jié)晶]→[pH11或6]肌苷品

精制 將粗品配成5%-10%的溶液，加熱溶解，抽濾，冷卻，過(guò)濾，少量水洗，烘干，即得肌苷精制品。

肌苷粗品[蒸餾水]→[重結(jié)晶]肌苷成品。

核糖核酸(RNA)水解法

細(xì)胞中含有核糖核酸和脫氧核糖核酸(DNA)，而RNA水解可得4種核苷酸：腺苷酸、鳥(niǎo)苷酸、胞苷酸和尿苷酸，其中鳥(niǎo)苷酸和由腺苷酸轉(zhuǎn)化而來(lái)的肌苷酸是呈味物質(zhì)。核苷酸有2’-核苷酸、3’-核苷酸和5’-核苷酸，其中只有5’-核苷酸即5’-鳥(niǎo)苷酸和5’-肌苷酸具有呈味性能。

RNA的提取常以RNA含量較高的酵母(最為常用)和白地霉細(xì)胞(含RNA4～11%)為原料，采用稀堿液抽提。將酵母干細(xì)胞用水配成5%～10%的懸浮液，加入氫氧化鈉使其質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)1%；在20℃下攪拌30～45min，再用6mol/L的鹽酸中和至Ph=7.0；加熱至900c時(shí)保溫10min，以殺滅霉菌，再冷卻至2~4℃靜置2～3d；取上層清液用6mol/L的鹽酸調(diào)Ph值至2.5(RNA等電點(diǎn))，在2~4℃靜置過(guò)夜；過(guò)濾得RNA，并用乙醇洗滌、干燥得RNA含量60%～70%的產(chǎn)品，產(chǎn)率4%～5%。酵母細(xì)胞也可在6%、8%的鹽酸中浸提。

RNA水解 在30℃下將橘青霉菌ThoM的紫外線變異株N-10-14用麩皮培養(yǎng)5d，用90L的水抽提50kg的曲，得89L含有強(qiáng)力核酸酶P1(5’-磷酸二酯酶)的抽提液；將400mL酶液加入10L0.8%的RNA溶液中，調(diào)Ph值為5.6，并在65℃下反應(yīng)2h，得混合核苷酸(腺苷酸0.22%、鳥(niǎo)苷酸0.19%、尿苷酸0.18%和胞苷酸0．14%)。

核苷酸的分離 利用各種核苷酸具有不同的等電點(diǎn)，用強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂來(lái)分離。將上述核苷酸混合液調(diào)Ph值至8，用國(guó)產(chǎn)717樹(shù)脂上柱吸附，再依次用0.02mol/L甲酸、0.15mol/L甲酸、0.01mol/L甲酸-0.05mo1/L I甲酸鈉和0.1 mol/L甲酸-0.1 mol/L甲酸鈉洗脫，分別得到胞苷酸、腺苷酸、尿苷酸和鳥(niǎo)苷酸。

從腺苷酸制備肌苷酸鈉 在30℃下用麩皮培養(yǎng)米曲霉48h，加10倍的水浸泡3h，得脫氨酶液在腺苷酸液中加入10%的脫氨酶液，并在50～60℃和Ph=6下反應(yīng)3h；加熱至100℃以殺酶，過(guò)濾，取清液真空濃縮、結(jié)晶得產(chǎn)品肌苷酸二鈉。

發(fā)酵法生產(chǎn)5L肌苷酸鈉

生產(chǎn)中主要采用的發(fā)酵法為葡萄糖直接發(fā)酵法，或葡萄糖發(fā)酵生產(chǎn)肌苷，再磷酸化生成肌苷酸。

直接發(fā)酵法——一步法 以葡萄糖為碳源，異變株或產(chǎn)氨短桿菌為生產(chǎn)菌，直接發(fā)酵生產(chǎn)肌苷酸。

二步法 以60～70g/L的葡萄糖為碳源，以枯草芽孢桿菌為生產(chǎn)菌，在30～32℃、Ph=5～7下發(fā)酵80h生產(chǎn)肌苷；肌苷再與磷酸三乙酯反應(yīng)生成肌苷酸。

生產(chǎn)方法 1核糖核酸（RNA）水解法

細(xì)胞中含有核糖核酸和脫氧核糖核酸（DNA），而RNA水解可得4種核苷酸：腺苷酸、鳥(niǎo)苷酸、胞苷酸和尿苷酸。其中鳥(niǎo)苷酸和由腺苷酸轉(zhuǎn)化而來(lái)得肌苷酸是呈味物質(zhì)。核苷酸有2’-、3’-和5’-核苷酸，其中只有5’-核苷酸即5’-鳥(niǎo)苷酸和5’-肌苷酸具有呈味性能。（1）RNA的提取。常以RNA含量較高的酵母（最為常用）和白地霉細(xì)胞（含RNA4%-11%）為原料，采用稀堿液抽提。將酵母干細(xì)胞用水配成5%-10%的懸浮液，加入氫氧化鈉使其質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)1%；在20℃下攪拌30-45min，再用6mol/L的鹽酸中和至PH=7.0，加熱至90℃時(shí)保溫10min，以殺滅霉菌，再冷卻至2-4℃靜置2-3天；取上層清液用6mol/L的鹽酸調(diào)PH至2.5(RNA等電點(diǎn))，在2-4℃靜置過(guò)夜；過(guò)濾得RNA，并容乙醇洗滌、干燥得RNA含量60-70%的產(chǎn)品，產(chǎn)率4%-5%酵母細(xì)胞也可在6%-8%的鹽酸中浸提。

（2）RNA水解。在30℃下將橘青霉素ThoM的紫外線變異株N-10-14用麩皮培養(yǎng)5天，用90L的水提取50kg的曲，得89L含有強(qiáng)力核算酶P1（5’-磷酸二酯酶）的抽提液；將400mL酶液加入10L0.8%的RNA溶液中，調(diào)PH為5.6，并在65℃下反應(yīng)2h，得混合核苷酸（腺苷酸0.22%、鳥(niǎo)苷酸0.19%和胞苷酸0.14%）。

（3）核苷酸的分離。利用各種核苷酸具有不同等電的性質(zhì)，用強(qiáng)堿性陰離子交換樹(shù)脂來(lái)分離。將上述核苷酸混合液調(diào)PH至8，用國(guó)產(chǎn)717樹(shù)脂上柱吸附，再依次用0.02mol/L甲酸、0.15mol/L甲酸、0.01mol/L甲酸+和0.1mol/L甲酸+0.1mol/L甲酸鈉洗脫，分別得到胞苷酸、腺苷酸、尿苷酸和鳥(niǎo)苷酸。

(4)從腺苷酸制備肌苷酸鈉。在30℃下用麩皮培養(yǎng)米曲霉48h，加10倍水浸泡3h，得脫氨酶液；在腺苷酸液中加入10%的脫氨酶液，并在50-60℃和PH=6下反應(yīng)3h；加熱至100℃以殺酶，過(guò)濾，取清液真空濃縮、結(jié)晶得產(chǎn)品肌苷酸二鈉。

2 發(fā)酵法生產(chǎn)5’-肌苷酸鈉

生產(chǎn)中采用的發(fā)酵法主要為葡萄糖直接發(fā)酵法，或葡萄糖家教生產(chǎn)肌苷，再磷酸化生成肌苷酸。

（1）直接生產(chǎn)發(fā)酵—— 一步法。以葡萄糖為碳源，異變株或產(chǎn)氨短桿菌為生產(chǎn)菌，直接發(fā)酵生產(chǎn)肌苷酸。

（2）二步法。以60-70g/L的葡萄糖為碳源，以枯草芽孢桿菌為生產(chǎn)菌，在30-32℃、PH=5-7下發(fā)酵80h生產(chǎn)肌苷；肌苷再與磷酸三乙酯反應(yīng)生成肌苷酸。

由酵母所得核酸分解、分離而得。

淀粉糖化液(葡萄糖)經(jīng)直接發(fā)酵法制得肌苷酸，作選擇性羥基磷酸化，再精制中和成鈉鹽后結(jié)晶而得。

產(chǎn)品信息
[顏色]	白色
[重量]	25g