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能量轉(zhuǎn)移研究方法和熒光共振能量轉(zhuǎn)移在生物學(xué)上的應(yīng)用

化學(xué)先生 / 2019-08-29

1.能量轉(zhuǎn)移研究方法

能量轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究方法有穩(wěn)態(tài)光譜法(常用的有吸收光譜、熒光發(fā)射和偏振光請(qǐng)、線二色及圓二色譜等)和時(shí)間分辨光譜法(瞬態(tài)吸收和時(shí)間分辨熒光光譜)。能量轉(zhuǎn)移的理論研究方法包括確定型方法、隨機(jī)型方法。

2.熒光共振能量轉(zhuǎn)移在生物學(xué)上的應(yīng)用

熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET) (Fluorescence/ Forster resonance energy transfer) 是比較分子間距離與分子直徑的有效工具，廣泛用于研究各種涉及分子間距離變化的生物現(xiàn)象，測(cè)量前先將給體分子和受體分子標(biāo)記到蛋白質(zhì)，這樣可以通過測(cè)量給體分子和受體分子能量傳遞效率的變化來定量測(cè)定兩個(gè)發(fā)光基團(tuán)之間的距離。FRET 在蛋白質(zhì)空間構(gòu)象、蛋白與蛋白間相互作用、核酸與蛋白間相互作用以及其他一些方面的研究中得到廣泛應(yīng)用。FRET的應(yīng)用:

①可用于研究蛋白質(zhì)以及蛋白復(fù)合體的結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)象與布局。

②研究蛋白質(zhì)的折疊，蛋白質(zhì)折疊是一個(gè)非常繁雜的過程，因?yàn)樗婕暗酵ㄟ^大量途徑來將無數(shù)去折疊構(gòu)象連接成為唯一的天然構(gòu)象。在用實(shí)驗(yàn)方法來探索各個(gè)途徑所占比例的漫長(zhǎng)過程中，F(xiàn)RET已經(jīng)能夠測(cè)量自由狀態(tài)下單分子蛋白折疊的表面自由能特征，這些數(shù)據(jù)用其他方法是難以得到的。

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