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       羧酸的酰肼類和具有自由－NH₂基團(tuán)的肼及其衍生物相似，因它們含有－CO－NH－NH₂基團(tuán)，所以都是會(huì)和醛類及酮類縮合的。例如，它們和水楊醛的一般反應(yīng)如下：

所產(chǎn)生的腙類，其結(jié)構(gòu)和具橙-黃色螢光并不溶于水的二水楊醛連氮相似，亦是不溶于水，在紫外光下發(fā)出強(qiáng)烈的螢光（黃-綠色到藍(lán)-綠色）。反應(yīng)（1）的縮合產(chǎn)物因含有酚型－OH基團(tuán)，一如水楊醛及二水楊醛連氮，可溶于氨而成黃色的溶液。其縮合產(chǎn)物對(duì)稀酸（二水楊醛連氮是不溶的）的性行，似要取決于R基或芳基的本性。有些腙類不溶或略溶于稀酸（例如水楊肼所形成的產(chǎn)物），有的被酸溶解而不分解（例如三種同分異構(gòu)的吡啶羧酰肼所形成的產(chǎn)物），有的卻會(huì)被酸分解（例如苯酰肼和水楊醛的縮合產(chǎn)物）。反應(yīng)（1）的實(shí)現(xiàn)及酸類對(duì)這一反應(yīng)所形成腙類的作用，就使肼的分裂出來成為可能，這肼又會(huì)和水楊醛縮合產(chǎn)生酸穩(wěn)定而發(fā)螢光的二水楊醛連氮。

       酰肼類和水楊醛的直接縮合，可使成為酰肼類的一般試驗(yàn)法，但需要有一中性介質(zhì)或弱堿性的氨介質(zhì)?？墒怯捎谒畻钊┑陌比芤河悬S-綠色的螢光，這就不可能由此直接檢定小量的氨溶縮合產(chǎn)物，因它們也是會(huì)發(fā)出藍(lán)-綠色或黃-綠色螢光的。如將酰肼與水楊醛的混合物一滴，用氨少許處理后，再放在濾紙上，這種干擾就可防止。在這種情況下，氨-水楊醛的螢光可在數(shù)分鐘內(nèi)消失掉，而水楊醛和酰肼類縮合產(chǎn)物所生的螢光，仍舊可以持續(xù)存在。但此螢光的強(qiáng)度會(huì)逐漸減小，在小量時(shí)會(huì)完全消失。如將斑點(diǎn)持向氨上，又會(huì)立即恢復(fù)。這是點(diǎn)滴試驗(yàn)中有時(shí)遇到的效應(yīng)之一例，也就是紙上斑點(diǎn)反應(yīng)特別靈敏而可靠的地方，因此，紙的作用似是反應(yīng)中一個(gè)活潑的參加者。在本例中，事物的過程是水楊醛的氨溶液，放于紙上后，由于酚鹽的失氨，就留下了水楊醛；水楊醛或不從紙的表面上揮發(fā)出去，或因高度分散而被空氣很快地氧化為水楊酸。這種說法得到了下例事實(shí)的支持：如將水楊醛的飽和水溶液一滴放在濾紙上，立刻用氨處理，就有黃-綠色的螢光斑點(diǎn)產(chǎn)生，但很快地就消逝了。若過了3～4分鐘，再用氨處理，就不發(fā)生螢光。
       操作手續(xù)    將酸性或中性試液一滴與水楊醛的溶液一滴混和后，移到濾紙上。過了3～5分鐘后，將紙放在氨水上面，立刻在紫外光下檢視。斑點(diǎn)上的藍(lán)-綠色或黃-綠色的螢光，即表示酰肼的存在。數(shù)分鐘后，螢光消逝，但重行暴露在氨水上面，又可以再生。
       試劑：9毫升水楊醛飽和水溶液，用前以1毫升冰醋酸使其酸化。
       這個(gè)操作手續(xù)，用下列各物，可給出正反應(yīng)：

       環(huán)狀3－氨基酞酰肼不起反應(yīng)。對(duì)－硝基苯（甲）酰肼沒有反應(yīng)；此或因－NO₂基團(tuán)的一種熄滅螢光效應(yīng)所致。