581－G型光電比色計(jì)和72型分光光度計(jì)，工作波段都在400～800nm范圍內(nèi)，只能測(cè)定物質(zhì)在可見(jiàn)光區(qū)的吸收光譜，而國(guó)產(chǎn)75－1型分光光度計(jì)，工作波段在200～1000nm范圍內(nèi)，可測(cè)定物質(zhì)在紫外區(qū)，可見(jiàn)光區(qū)及近紅外區(qū)的吸收光譜，因而它的應(yīng)用范圍更為廣泛。
下面介紹一下紫外吸收光譜在分析工作中的應(yīng)用：
根據(jù)物理知識(shí)，光波的波長(zhǎng)愈短，能量愈大。紫外光的波長(zhǎng)范圍為200～400nm，而可見(jiàn)光的波長(zhǎng)范圍為400～800nm。所以紫外光的能量比可見(jiàn)光的能量大，可見(jiàn)光只能激發(fā)物質(zhì)分子中處于不穩(wěn)定能級(jí)的價(jià)電子，而紫外光可激發(fā)比較穩(wěn)定的不飽和鍵的π電子，尤其是共軛體系中π電子。因而共軛的不飽和碳?xì)浠衔锖途哂泄聦?duì)電子的化合物（包括無(wú)機(jī)化合物）在紫外區(qū)都有吸收光譜。反之，飽和的碳?xì)浠衔镌谧贤鈪^(qū)不產(chǎn)生吸收峰，因此，常以飽和的碳?xì)浠衔镒鳛樽贤馕展庾V分析的溶劑（例如己烷、庚烷、環(huán)己烷等）。
紫外吸收光譜大多應(yīng)用于鑒定含有雙鍵、尤其是共軛體系的化合物，如含羰基、醛基、羧基、硝基等的脂肪族化合物，以及含苯環(huán)的芳香族化合物。
.jpg "可見(jiàn)紫外分光光度計(jì)")
75－1型分光光度計(jì)（圖13－15）采用自準(zhǔn)式光路，單光束非記錄型，其波長(zhǎng)范圍為200～1000nm。在波長(zhǎng)320～1000nm范圍內(nèi)，用鎢絲白熾燈泡作光源，在波長(zhǎng)200～320nm范圍內(nèi)，用氫弧燈作光源。
.jpg "75－1型分光光度計(jì)光學(xué)系統(tǒng)立體圖")
由光源（3或1）發(fā)出的連續(xù)輻射光線，射到聚光凹面鏡2上，被反射到平面鏡4，然后又反射至入射狹縫S1上，由此入射到單色器內(nèi)。而狹縫S1正好位于球面準(zhǔn)直物鏡7的焦面上，因此入射光線到達(dá)物鏡7上反射后，就以一束平行光射向棱鏡8（該棱鐿背面是鍍鋁的），入射角在最小偏向角，入射光穿過(guò)石英棱鏡，為棱鏡底面所反射，重又穿過(guò)棱鏡。經(jīng)過(guò)棱鏡的色散作用，分開(kāi)為光譜帶。這樣從棱鏡色散出來(lái)的光線經(jīng)準(zhǔn)直物鏡7反射后，就會(huì)聚在出射狹縫S2上。為了消除雜散光對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響，在出射狹縫S2后裝有濾光片10。光線經(jīng)過(guò)濾光片后進(jìn)入試樣室，室中裝著被測(cè)溶液的比色槽，光線通過(guò)被測(cè)溶液比色槽后照射到光電管的陰極面上，產(chǎn)生光電流。光電流在一個(gè)高電阻上產(chǎn)生電壓降，此電壓降由直流放大器放大后用精密電位計(jì)測(cè)量，即可得到溶液的透射百分率或光密度。
儀器按說(shuō)明書(shū)安裝，調(diào)校正常后，使用時(shí)操作步驟如下。
（1）開(kāi)穩(wěn)壓電源，開(kāi)所需光源（鎢燈6V，適用波長(zhǎng)320～1000nm；氫弧燈調(diào)節(jié)至300毫安，適用波長(zhǎng)200～320nm），并將燈罩上反射鏡轉(zhuǎn)動(dòng)手柄扳在“鎢燈”或“氫弧燈”位置。
（2）將暗電流閘門(mén)處在“關(guān)”的位置。
（3）將選擇開(kāi)關(guān)扳在“校正”上。
（4）調(diào)節(jié)暗電流鈕使電表指零。
（5）靈敏度調(diào)節(jié)位置是從左面停止位置順時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)五圈左右。
（6）將波長(zhǎng)刻度旋在所需波長(zhǎng)上。
（7）選定適應(yīng)波長(zhǎng)的光電管，手柄推入為紫敏光電管（200～625nm），手柄拉出為紅敏光電管（625～1000nm）（根據(jù)需要可以用相應(yīng)的濾光片推入光路，以減少雜散光，通常情況下可以不用）。
（8）根據(jù)波長(zhǎng)選用比色槽。對(duì)于350nm以上的波長(zhǎng)，可用玻璃比色槽。對(duì)于350nm以下，一定要用石英比色槽。將比色槽放入托架內(nèi)（其中一個(gè)槽內(nèi)裝空白溶液，另外三個(gè)裝被測(cè)溶液），將空白溶液置于光路中，然后把蓋板蓋好。
（9）把讀數(shù)電位器放在透光率100％上。
（10）把選擇開(kāi)關(guān)扳到“×1”上。
（11）拉拉桿13，拉開(kāi)暗電流閘門(mén)，使單色光進(jìn)入光電管。
（12）調(diào)節(jié)狹縫大致使電表指針指零，而后再用靈敏度旋鈕細(xì)調(diào)，使電表指針準(zhǔn)確指在零上。
（13）將試樣溶液置于光路中（同時(shí)注意滑板是否處在定位槽中），這時(shí)電表指針偏離“零”位。
（14）旋轉(zhuǎn)讀數(shù)電位器刻度盤(pán)重新使電表指針指零。
（15）在平衡之后，將暗電流閘門(mén)重新關(guān)上，以便保護(hù)光電管，勿使其因受光時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而疲勞。
（16）讀取透過(guò)率或相應(yīng)的消光值：當(dāng)選擇開(kāi)關(guān)放在“×1”上，透光率范圍是0～100％，相應(yīng)的消光值范圍是∞～0。當(dāng)透光率小于10％時(shí)，則可將選擇開(kāi)關(guān)放在“×0．1”的位置上，得到較精確的讀數(shù)，此時(shí)所讀出的透光率數(shù)值，應(yīng)以10除之，或相應(yīng)地對(duì)于所讀出的消光值應(yīng)加1．0。
（17）測(cè)定完畢，應(yīng)切斷電源，將選擇開(kāi)關(guān)放在“關(guān)”，取出比色槽，用罩罩好整個(gè)儀器。
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