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        在1994年和1996年，美國Jahng和Wood發(fā)表了以OB3b菌為背景的基因工程菌降解三氯乙烯和氯仿的研究結果，當時由于構建的基因工程菌活性極低，所以他們認為該基因工程菌可能沒有活性。2002 年，Wood在Microbiol. Comm.上又發(fā)表文章指出，1994年和1996年發(fā)表的那兩篇論文，對基因工程菌活性的判斷可能有誤。他們認為，第一個以菌株OB3b為背景構建的Psudomonas Putida F1是有活性的，因為對TCE(三氯乙烯)的降解活性為5nmol/(min.mg)。而在1996年的報道中，由于他們使用的是休止細胞，對TCE的降解率雖然只為6~ 8μmol/(L.5h),但也有相應量的氯化物產(chǎn)生。第2個證據(jù)是MMO缺失型P. Putida F1,在甲苯不足的葡萄糖培養(yǎng)液中生長，不能表達甲苯雙加氧酶，故P. Puida F1菌株也不能降解TCE,而含sMMO的基因工程菌P. Putida F1是能夠降解TCE的。這就證明了sMMO的活性可以進行成功表達。1996 年的報道還表明，來自于OB3b的sMMO重組基因，在P. Putida F1、Agrobacterium tumefaoiens A114 和Rhizobium meliloti 102F34 三個不同宿主中表達，采用標準的MMO活性分析方法，測定它們的粗提取液對丙烯環(huán)氧化的活性，也得到類似結果。因此可以斷言，在1994年和1996年的報道中，基因重組的sMMO雖然活性極低，但畢竟還是有活性，應該是可溶性甲烷單加氧酶基因的首次成功表達。