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 辣根過氧化物酶

中文名稱：辣根過氧化物酶

英文名稱：Peroxidase from horseradish

別名：過氧化物酶，辣根；辣根過氧化物酶；過氧化物辣根酶；HRP；POD

分子式: H2O3

分子量: 50.01410

CAS編號：9003-99-0

質(zhì)檢信息

質(zhì)檢項(xiàng)目      指標(biāo)值

含量，％      ≥98.0

酶活力/(U/mg) ≥250.0

Psa：         146.05

Logp：        2.5925

產(chǎn)品用途

辣根過氧化物酶用作生命科學(xué)，酶標(biāo)記法所用的一種主要酶；生物液體中葡萄糖和半乳糖測定實(shí)驗(yàn)。

1.過氧化物酶（辣根）是目前在ELISA中應(yīng)用最為廣泛的標(biāo)記用酶之一，主要是因?yàn)槠淙菀字频?，價(jià)格相對較低，且性質(zhì)穩(wěn)定，耐熱和有機(jī)溶劑，與抗原或抗體偶聯(lián)后，活性損失很小。

2.它也常用與污水處理。工業(yè)廢水中含有大量的苯酚，雙酚A等分類和芳香胺類化合物，等環(huán)境污染較大，它可以將這些污染物作為底物，氧化成自由基，自由基在聚集成沉淀聚合物，從而大大降低對環(huán)境的污染。

3.它近幾年來被研究用作食品添加劑。由于其本身無毒無害，反應(yīng)條件溫度，反應(yīng)易控制，近年來被研究用于食品的保鮮，解毒和檢測等領(lǐng)域。

4.檢測領(lǐng)域：可以與葡萄糖氧化酶聯(lián)用，用以檢測葡萄糖含量。

化學(xué)性質(zhì)

辣根過氧化物酶又稱過氧化物辣根酶是一種由酶蛋白和鐵卟啉結(jié)合而成的一種糖蛋白，為棕褐色凍干粉，對空氣、熱和濕敏感。一種具有氧化還原酶性質(zhì)的血紅素蛋白,沸點(diǎn)：78.5ºC,熔點(diǎn)：-114.1ºC,酶反應(yīng)：供體+Ｈ２Ｏ氧化供體+2H2O。最適pH約7.0。等電點(diǎn)pI7.2。λmax 275nm(蛋白帶)，403nm(索瑞氏帶soret band)、500nm(其他帶)。干燥制劑和2.8mol/L硫酸銨溶液(pH約6.0)在0～4℃時(shí)至少可穩(wěn)定一年,溶于水,冷藏品-2-8℃,具致敏性。是由酶蛋白和鐵卟啉結(jié)合而成的一種糖蛋白，該酶由多個(gè)同功酶組成，分子量為40kDa，等電點(diǎn)為pH3.0?9.0。HRP的輔基和酶蛋白最大吸收光譜分別在403nm和275nm，所以人們通常采用RZ值（即OD403nm/OD275nm的比值）來表示該酶的純度，RZ值越大，純度越高。

檢測方法

一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，所述的檢測方法包括以下步驟：(1)配制一系列以辣根過氧化物酶為標(biāo)準(zhǔn)酶的標(biāo)準(zhǔn)酶溶液；(2)以過氧化脲為反應(yīng)底物，以3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺為顯色劑，以磷酸二氫鈉緩沖液為緩沖液，分別測試步驟(1)中所配制的標(biāo)準(zhǔn)酶溶液，測試的反應(yīng)溫度為20-30℃，反應(yīng)pH值為4.0-5.0，反應(yīng)時(shí)間為30-90s，反應(yīng)結(jié)束后加入稀硫酸溶液，終止反應(yīng)，獲得反應(yīng)產(chǎn)物溶液；(3)將各反應(yīng)產(chǎn)物溶液置于紫外分光光度計(jì)中，在450nm的吸收波長下分別測定其OD值，獲得辣根過氧化物酶濃度-OD值的標(biāo)準(zhǔn)曲線；(4)測試待測豬肉中過氧化物酶反應(yīng)后其反應(yīng)產(chǎn)物溶液的OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出豬肉中過氧化物酶的濃度。

制備方法

以辣根為原料，經(jīng)水抽提后由硫酸銨第一次分級，磷酸鈣凝膠純化，再由乙醇分級，硫酸銨第二次分級，結(jié)晶精制得產(chǎn)品。

1.將辣根破碎、浸提、離心得到辣根過氧化物酶粗提液；

2.將辣根過氧化物酶粗提液用截留分子量為70kDa?100kDa的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到辣根過氧化物酶超濾液；

3.將辣根過氧化物酶超濾液用截留分子量為1?30kDa的超濾膜進(jìn)行超濾濃縮，得到辣根過氧化物酶濃縮液；

4.將辣根過氧化物酶濃縮液脫水得到辣根過氧化物酶。

產(chǎn)品信息
[重量]	250mg
[顏色]	白色
危險(xiǎn)性類別
[危險(xiǎn)性類別]	非危險(xiǎn)品