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生物堿的薄層色譜實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)室k / 2019-08-08

一、目的

(1)掌握薄層硬板的制備方法。

(2)掌握薄層色譜的一般操作方法。

(3)了解薄層色譜在分離、鑒定方面的應(yīng)用。

二、提要

喹啉衍生物類(lèi)生物堿可用薄層色譜法分離、鑒定。例如：

可用下列展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi)。

丙酮-甲醇-二乙胺(5：5：1)

苯-乙醚-二乙胺(8：5：2)

氯仿-二乙胺(9：1)

氯仿-乙醇(9：1)

本實(shí)驗(yàn)選用奎寧和辛可寧作試樣，苯-乙醚-二乙胺(8：5：2)作展開(kāi)劑，用改良碘化鉍鉀試劑顯色。

三、儀器與試劑

(1)儀器：色譜缸、玻璃板(3×20cm)、毛細(xì)管、噴霧器、乳缽、電吹風(fēng)、天平。

(2)試劑：0.5％奎寧的氯仿溶液、0.5％辛可寧的氯仿溶液、待檢樣品、苯-乙醚-二乙胺(8：5：2)、改良碘化鉍鉀試劑、硅膠G。

四、實(shí)驗(yàn)步驟

1.硅膠G板的制備稱硅膠G1.5g置乳缽中，加水約3.5ml，輕輕研勻(約1～1.5min)，立即倒在整塊玻璃板(3×20cm)上，用乳缽研頭(或玻璃棒)稍加涂勻，隨后就用左手持玻璃板，用右手中指在背面輕輕敲擊玻璃板，使鋪成平坦均勻的薄板。立即放在水平臺(tái)面上靜置，使其自然干燥。用同樣方法再制一塊。然后于110℃烘箱中活化1/2～1h，置于干燥器中備用。

2.點(diǎn)樣取薄板二塊，在距一端3cm處，用細(xì)針在兩側(cè)戳幾個(gè)點(diǎn)，作為起始線。分別按下面點(diǎn)樣：

端距：3cm；點(diǎn)距：1.5cm；點(diǎn)樣量：1～2次；點(diǎn)直徑：2～3mm。

3.展開(kāi) 在色譜缸中放入展開(kāi)劑7.5ml，將薄板放入色譜缸中，密閉，待飽和后(約10min)，展開(kāi)，展開(kāi)劑浸沒(méi)薄板下端的深度為0.5cm。待展開(kāi)劑前沿離起始線約10cm時(shí)，(約需60min)取出，立即用鉛筆劃出前沿，用電吹風(fēng)吹干(可吹薄板的背面)。

4.顯色在薄板上噴以改良碘化鉍鉀試劑，用鉛筆標(biāo)出斑點(diǎn)的位置，并記錄斑點(diǎn)的顏色。

5.定性分別測(cè)量Rf值，鑒別待檢樣品，是奎寧還是辛可寧。

五、思考題

1.影響吸附薄層色譜Rf值的因素有哪些？

2.在操作中應(yīng)該注意哪些問(wèn)題？

3.試比較比移值和相對(duì)比移值的優(yōu)缺點(diǎn)。

4.奎寧和辛可寧，哪個(gè)Rf值大？為什么？

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