硝酸鹽胨水培養(yǎng)基
中文名稱:硝酸鹽胨水培養(yǎng)基
英文名稱:Nitrate Saline Peptone Water Medium
貨號: HB5220
質(zhì)檢信息
質(zhì)檢項目 指標值
蛋白胨 10.0
酵母浸粉 3.0
硝酸鉀 2.0
亞硝酸鈉 0.5
pH值7.4±0.1 25℃
產(chǎn)品用途
硝酸鹽胨水培養(yǎng)基用作硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗。
硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗方法及原理
方法:取可疑菌落接種在含小導(dǎo)管的硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基內(nèi),35℃培養(yǎng)24小時,小導(dǎo)管內(nèi)有氣體產(chǎn)生實驗結(jié)果為陽性,否則為陰性。
原理:硝酸鹽胨水培養(yǎng)基主要用于硝酸鹽還原實驗。蛋白胨、酵母粉提供碳氮源、維生素和生長因子;硝酸鉀為可利用的硝酸鹽。銅綠假單胞菌是一類專性需氧菌、以有機碳作為能源的異養(yǎng)硝化菌,能通過產(chǎn)生的酶分四步還原硝酸鹽,將硝酸鹽分解產(chǎn)生氮氣。
用法
稱取本品 15.5g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝試管,并加入小倒管,115℃高壓滅菌 20 分鐘,備用。
硝酸鹽胨水培養(yǎng)基微生物靈敏度試驗
按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置30-35℃需氧培養(yǎng)18-24小時。
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其它特征 |
天腸埃希氏菌 |
CMCC(B)44102 |
>5000 |
+++ |
不產(chǎn)氣 |
綠膿桿菌 |
CMCC(B)10104 |
>5000 |
+++ |
產(chǎn)氣 |
單增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
>5000 |
+++ |
不產(chǎn)氣 |
綠膿桿菌 |
ATCC27853 |
>5000 |
+++ |
產(chǎn)氣 |
不同細菌在硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基上的生長特征
硝酸鹽胨水培養(yǎng)基的使用原理及方法
一、實驗原理
用于硝酸鹽還原產(chǎn)氣實驗。蛋白胨、酵母粉提供碳氮源、維生素和生長因子;硝酸鉀和亞硝酸鈉為可利用的硝酸鹽;銅
綠假單胞菌是一-類專性需 氧菌、以有機碳作為能源的異養(yǎng)硝化菌,能通過產(chǎn)生的酶分四步還原硝酸鹽,將硝酸鹽分解產(chǎn)生
氮氣。
二、試驗方法
1、稱取本品15. 5g,加熱溶解于1000m1蒸餾水中,分裝試管, 116C高壓滅菌20分鐘,備用。
2、制備質(zhì)控菌液。
3、把質(zhì)控菌液加入試管中。
4、在36C培養(yǎng)18-24小時,記錄實驗結(jié)果。
三、結(jié)果判定
接種以下質(zhì)控菌株,在36土1C培養(yǎng)18- 24小時
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
渾濁,不產(chǎn)氣 |
銅綠假單胞菌 |
CMCC(B)10104 |
10-100 |
+++ |
渾濁,產(chǎn)氣 |
單增李斯特氏菌 |
ATCC 19114 |
10-100 |
+++ |
渾濁,不產(chǎn)氣 |
銅綠假單胞菌 |
ATCC 27853 |
10-100 |
+++ |
渾濁,產(chǎn)氣 |
硝酸鹽胨水培養(yǎng)基微生物質(zhì)控結(jié)果如圖
a:大腸埃希氏菌,b:銅綠假單胞菌(CMCC(B)10104) c:銅綠假單胞菌( ATCC27853),d:單增李斯特氏菌,e:空白對照圖
生產(chǎn)方法(同行參考配制)
稱取本品15.5g于1L蒸餾水或去離子水中,煮沸溶解,分裝至含有倒管的試管中,115℃高壓滅菌20分鐘,備用。硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基用于綠膿桿菌的硝酸鹽分解試驗。
制法:溶解,校正pH,分裝試管,每管約5mL,121℃高壓滅菌15min。
硝酸鹽還原試劑
甲液:將對氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。
乙液:將甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。
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