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 明膠生化管

中文名稱：明膠生化管

中文別名：細(xì)菌微量生化鑒定管

英文名稱：Bacterial trace biochemical identification tube

產(chǎn)品貨號(hào)：GB066

質(zhì)檢信息

質(zhì)檢項(xiàng)目        指標(biāo)值

含量                99.9 %

檢驗(yàn)依據(jù) 中華人民共和國(guó)藥典

規(guī)格：            250g

產(chǎn)品規(guī)格：  1ml×20支/盒

保質(zhì)期：        一年

化學(xué)特性

明膠生化管又稱細(xì)菌微量生化鑒定管，明膠為從骨膠原而來(lái)的一種蛋白質(zhì)，可溶于熱水，形成的溶液凝固點(diǎn)在20-30℃，低溫時(shí)呈固態(tài)狀不流動(dòng)，超過(guò)30℃時(shí)呈液體狀。某些細(xì)菌具有明膠酶，可將明膠水解為多肽、氨基酸后失去凝膠性質(zhì)，低溫下不再凝固。

產(chǎn)品用途

明膠生化管用作變形桿菌、銅綠假單胞菌的檢測(cè)。

產(chǎn)品用法

方法：取可疑菌落穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，取出后放2-8度冰箱10-30min，如果仍為液體，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，否則為陰性。

原理：有些細(xì)菌具有明膠酶（亦稱類蛋白水解酶），能將明膠先水解為多肽，又進(jìn)一步水解為氨基酸，失去凝膠性質(zhì)而液化。

結(jié)果判斷

不同細(xì)菌在明膠生化管上的生化反應(yīng)現(xiàn)象

 

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明膠液化實(shí)驗(yàn)操作視頻

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操作步驟：

可使用溫水、培養(yǎng)箱或用手捂熱等方法將明膠生化管溫?zé)嶂链蠹s30-40℃，培養(yǎng)基呈液體流動(dòng)狀，擺直立，打開(kāi)生化管，可用接種針或接種環(huán)挑取待測(cè)菌落穿刺接種或加入50-100μL的約109CFU/mL的菌懸液，纏上封口膜，置于36℃或其他適宜的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。

結(jié)果觀察：

將生化管放入冰箱冷藏中10-20min或采用其他方法將培養(yǎng)基冷卻至10℃左右，傾斜生化管，觀察培養(yǎng)基是否能凝固。若培養(yǎng)基凝固不流動(dòng)，說(shuō)明明膠未被分解液化，為陰性反應(yīng)；若培養(yǎng)基不能凝固呈液體狀，說(shuō)明明膠已被水解，為陽(yáng)性反應(yīng)。

注意事項(xiàng)：

（1）明膠在培養(yǎng)箱中和室溫較高時(shí)呈液態(tài)狀，因此觀察試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，必須確保培養(yǎng)基已完全冷卻。

（2）細(xì)菌液化明膠的時(shí)間存在差異，有些細(xì)菌可在18-24h液化，有些細(xì)菌需要3-7天甚至更長(zhǎng)時(shí)間才能液化，當(dāng)出現(xiàn)陰性結(jié)果時(shí)，應(yīng)至少觀察一周。

（3）明膠的凝固點(diǎn)在28℃左右，受運(yùn)輸過(guò)程的溫度及震蕩影響，有可能出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀，此為正?，F(xiàn)象，并非質(zhì)量問(wèn)題，使用前可用水浴或培養(yǎng)箱或其他方法溫育，使培養(yǎng)基呈液體流動(dòng)狀，擺直立即可。

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明膠生化管微生物靈敏度試驗(yàn)

接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)72小時(shí)

質(zhì)控菌株	菌株編號(hào)	接種量(CFU)	參比或計(jì)數(shù)培養(yǎng)基	方法	質(zhì)控結(jié)果	其它特征
銅綠假單胞菌	ATCC9027	>5000	/	定性	+	液化
大腸埃希氏菌	ATCC25922	>5000	/	定性	-	不液化
蠟樣芽胞桿菌	ATCC11778	>5000	/	定性	+	液化

 

注意事項(xiàng)

明膠的凝固點(diǎn)在28℃左右，受運(yùn)輸過(guò)程的溫度及震蕩影響，有可能出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀，此為正常現(xiàn)象，并非質(zhì)量問(wèn)題，使用前可用水浴或培養(yǎng)箱或其他方法溫育，使培養(yǎng)基呈液體流動(dòng)狀，擺直立即可。

細(xì)菌微量生化鑒定管使用說(shuō)明書(shū)

一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

安瓿瓶：從包裝盒中取出安瓿瓶，朝易折點(diǎn)（瓶頸上方藍(lán)點(diǎn)）反方向用力折開(kāi)安瓿瓶；或用砂輪劃一圈安瓿瓶瓶頸，然后用力折開(kāi)安瓿瓶，插入安瓿瓶架中備用。如果染菌或變色，則不能使用，重新拿一支。

試 管：從包裝盒中取出試管，插入試管架中。如果染菌或變色，則不能使用，重新拿一支。

注：折開(kāi)安瓿瓶時(shí)最好包裹紗布，以免劃傷手指。

二、接種方法

直接接種：用接種針從平板上挑取已純化分離的同一菌落接種于需要試驗(yàn)的試管（安瓿瓶）中；菌懸液法：取一內(nèi)盛 2mL 無(wú)菌水試管，用接種針或接種環(huán)從平板上挑取已純化 1~3 個(gè)菌落至無(wú)菌水中仔細(xì)研磨成 0.5 麥?zhǔn)蠞岫鹊木患?xì)菌懸液，滴加 50~100μL 菌懸液至試驗(yàn)的試管（安瓿瓶）中。

注：如內(nèi)容物為直立半固體或斜面，則用接種針挑取菌落穿刺或“之”字形劃線接種。

三、接種后置于 36±1℃培養(yǎng)或檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中所規(guī)定的條件培養(yǎng)。

注：1.部分生化反應(yīng)結(jié)果判斷請(qǐng)參考備注及附錄說(shuō)明；

2.特殊細(xì)菌需放置在適宜生長(zhǎng)的條件下培養(yǎng)（如厭氧菌需置于厭氧環(huán)境下培養(yǎng)）；

3.培養(yǎng)時(shí)間超過(guò) 24h 的生化管，建議加蓋或封口膜（厭氧環(huán)境不能密封）。

四、生化管反應(yīng)結(jié)果列表

（請(qǐng)下載看PPT→）細(xì)菌微量生化鑒定管使用說(shuō)明書(shū)

附 錄 : 

生化反應(yīng) 1：氨基酸脫羧酶（雙水解酶）試驗(yàn)：此試驗(yàn)需同時(shí)接種氨基酸脫羧酶（雙水解酶）試驗(yàn)管和對(duì)照管，接種后需覆蓋約 300μL 無(wú)菌液體石蠟；培養(yǎng)結(jié)束后，若試驗(yàn)管紫色，對(duì)照管黃色，則為陽(yáng)性反應(yīng)；若試驗(yàn)管和對(duì)照管均為黃色，則為陰性反應(yīng)；若對(duì)照管渾濁不變黃或不生長(zhǎng)，則說(shuō)明待檢菌為氧化型細(xì)菌或產(chǎn)堿型細(xì)菌（不能在無(wú)氧條件下分解葡萄糖產(chǎn)酸），無(wú)法判斷試驗(yàn)結(jié)果。

生化反應(yīng) 2：葡萄糖酸鹽試驗(yàn)：培養(yǎng)結(jié)束后，按體積比 1:1 向生化管中加入班氏試劑，混勻煮沸 10min，冷卻后觀察結(jié)果，若出現(xiàn)黃色或橙紅色沉淀，則為陽(yáng)性反應(yīng)；若為藍(lán)色或綠色，則為陰性反應(yīng)。

生化反應(yīng) 3：氧化/發(fā)酵試驗(yàn)：每株菌接種 2 支生化管，接種后一支加液體石蠟封口，另一支不封口，培養(yǎng)結(jié)束后，二者均變黃為發(fā)酵型細(xì)菌，不封口者變黃而封口者不變色為氧化型細(xì)菌；二者均不變黃者為產(chǎn)堿型細(xì)菌。

生化反應(yīng) 4：硝酸鹽還原試驗(yàn)：培養(yǎng)結(jié)束后，滴加硝酸鹽還原試劑 A 液和 B 液各 2～3 滴，數(shù)秒后觀察顏色變化，若變紅，則為陽(yáng)性反應(yīng)；若不變色，繼續(xù)加入少量鋅?；蜾\粉，如仍不變紅，則也為陽(yáng)性反應(yīng)，如變紅，則為陰性反應(yīng)。

生化反應(yīng) 5：甲基紅試驗(yàn)（MR）：培養(yǎng)結(jié)束后，滴加甲基紅試劑 2～3 滴，混勻后立即觀察結(jié)果，如顯紅色則為陽(yáng)性，如顯黃色則為陰性反應(yīng)。生化反應(yīng) 6：V-P 試驗(yàn)：培養(yǎng)結(jié)束后滴加 V-P 試劑（A 液 6 滴，B 液 2 滴），混勻后繼續(xù)培養(yǎng) 0.5~4h，4h 之內(nèi)變紅則為陽(yáng)性，不變色或棕黃色為陰性。

生化反應(yīng) 7：苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)：培養(yǎng)結(jié)束后，滴加 2～3 滴苯丙氨酸指示劑（10%三氯化鐵），搖晃后數(shù)秒觀察試驗(yàn)結(jié)果，如出現(xiàn)變綠色反應(yīng)，則為陽(yáng)性；如不變色（黃色）則為陰性反應(yīng)。

生化反應(yīng) 8：明膠液化：培養(yǎng)結(jié)束后，將生化管置于 4℃左右的環(huán)境中約 30min，如內(nèi)容物不凝固呈液態(tài)狀，則為陽(yáng)性反應(yīng)，如內(nèi)容物凝固不流動(dòng)，則為陰性反應(yīng)。部分細(xì)菌的明膠液化反應(yīng)較慢，可能需延長(zhǎng)培養(yǎng) 3~7 天，方可觀察到陽(yáng)性結(jié)果。

生化反應(yīng) 9：靛基質(zhì)試驗(yàn)（吲哚試驗(yàn)）：培養(yǎng)結(jié)束后，需滴加 Kovacs 試劑 2～3 滴，搖勻后數(shù)秒內(nèi)觀察結(jié)果，如出現(xiàn)玫紅色環(huán)，則為陽(yáng)性反應(yīng)，如不變色（黃色環(huán)）則為陰性反應(yīng)。

產(chǎn)品信息
[重量]	10ml
[顏色]	無(wú)色液體
危險(xiǎn)性類別
[危險(xiǎn)性類別]	非危險(xiǎn)品