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 MUG培養(yǎng)基

中文名稱：MUG培養(yǎng)基

英文名稱：MUG Medium

貨號：   HB5213

產(chǎn)品規(guī)格：250g

質(zhì)檢信息

質(zhì)檢項(xiàng)目        指標(biāo)值

蛋白胨            10.0g

磷酸二氫鉀      0.9g

磷酸氫二鈉      6.2g

硫酸錳            0.0005g

亞硫酸鈉         0.04g

去氧膽酸鈉     1.0g

硫酸鎂            0.1g

氯化鈉            5.0g

氯化鈣            0.05g

MUG               0.075g

硫酸鋅            0.0005g

PH值              7.3±0.1

檢驗(yàn)依據(jù) 中華人民共和國藥典

保質(zhì)期： 三年

產(chǎn)品用途

MUG培養(yǎng)基用作大腸桿菌測試。

用法

稱取本品23.37克，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中， 分裝試管， 每管5ml，115℃高壓滅菌20分鐘備用。

注:培養(yǎng)基中含少量硫酸鎂、氯化鈣，滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。

檢驗(yàn)原理

胨提供碳氮源；硫酸銨、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸鎂、氯化鈉和氯化鈣提供各種離子可維持均衡的滲透壓及利于目標(biāo)菌的生長；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉為緩沖劑；亞硫酸鈉和去氧膽酸鈉為選擇性抑菌劑。

細(xì)菌的葡萄糖醛酸苷酶在堿性條件下，作用于4－甲基傘形酮-β-D 葡萄糖醛酸苷（4－Methylumbellifery－β－DGlucuronide簡稱MUG）的β糖醛酸苷鍵，使其水解，釋放的4－甲基傘形酮在366nm 紫外燈下產(chǎn)生藍(lán)白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。

MUG培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長特征

 

MUG培養(yǎng)基的使用方法視頻

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操作步驟：

1.取細(xì)菌的新鮮培養(yǎng)物，用接種環(huán)接種于生理鹽水管中，振蕩混勻。

2.按照10倍系列稀釋法制備菌液，取接種量為10-100cfu的菌懸液，進(jìn)行試驗(yàn)。

3. 用移液槍吸取100μL稀釋好的菌液接種到MUG培養(yǎng)基管中，接種兩個平行管，同時(shí)吸取100μL生理鹽水接種到MUG培養(yǎng)基管中作為空白對照。

4. 相同的方法接種其他菌株，之后放置于30-35℃培養(yǎng)5-24小時(shí)。

結(jié)果觀察：

發(fā)現(xiàn)接種大腸埃希氏菌和陰溝腸桿菌的試管變渾濁。而接種金黃色葡萄球菌的試管為澄清狀態(tài)。

葡萄糖醛酸苷酶檢測

在黑暗環(huán)境中，使用366nm紫外燈照射培養(yǎng)后的試管，發(fā)現(xiàn)接種兩株大腸埃希氏菌的試管均產(chǎn)生藍(lán)白色熒光，這是因?yàn)镸UG的β-糖醛酸苷鍵被大腸埃希氏菌產(chǎn)生的葡萄糖醛酸苷酶水解，釋放出4-甲基傘形酮，4-甲基傘形酮在紫外燈下可產(chǎn)生藍(lán)白色熒光。

而接種陰溝腸桿菌和金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)管無藍(lán)白色熒光，說明這兩株菌不能產(chǎn)生葡萄糖醛酸苷酶。

靛基質(zhì)試驗(yàn)

向培養(yǎng)后的試管滴加Kovacs靛基質(zhì)試劑2-3滴，立即觀察結(jié)果，也可以放置室溫5-10min觀察結(jié)果。發(fā)現(xiàn)接種兩株大腸埃希氏菌的試管均有紅色環(huán)產(chǎn)生，這是因?yàn)榈鞍纂酥械纳彼岜淮竽c埃希氏菌產(chǎn)生的色氨酸酶分解，形成靛基質(zhì)。靛基質(zhì)與Kovacs靛基質(zhì)試劑反應(yīng)，形成紅紫色醌式化合物，即紅色環(huán)。

而陰溝腸桿菌和金黃色葡萄球菌培養(yǎng)管有黃色環(huán)，說明這兩株菌均不含有色氨酸酶。

MUG培養(yǎng)基試驗(yàn)原理及試驗(yàn)結(jié)果：4-甲基傘形通葡糖苷酸(HUG) 培養(yǎng)基試驗(yàn)原理及試驗(yàn)結(jié)果：

一、用途及原理

  用于大腸桿菌的快速鑒定(mo試驗(yàn)及靛基質(zhì)試驗(yàn))。

  蛋白胨提供碳氮源;硫酸錳、硫酸鋅、硫酸鎂、氯化鈉和氯化鈣提供各種離子可維持均衡的滲透壓及利于目標(biāo)菌的生長;磷酸二氫鉀和磷酸氫_二鈉為緩沖劑;亞硫酸鈉和去氧膽酸鈉為選擇性抑菌劑,抑制革蘭氏陽性菌的生長。葡萄糖醛酸苷酶在堿性條件下，作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Me thylumbellifery- β -D-Glucuroni de簡稱MUG)的B糖醛酸苷鍵，使其水解，釋放的4-甲基傘形酮在36nm紫外燈下產(chǎn)生藍(lán)白色熒光。

  注:少數(shù)大腸埃希氏菌MUG試驗(yàn)為陰性,少數(shù)非典型大腸埃希氏菌靛基質(zhì)試驗(yàn)為陰性，有時(shí)需補(bǔ)充其他試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。

二、培養(yǎng)基配方(g/L)

蛋白胨	10.0
磷酸二氫鉀	0.9
磷酸氫二鉀	6.2
硫酸錳	0.005
亞硫酸鈉	0.04
去氧膽酸鈉	1.0
硫酸鎂	0.1
氯化鈉	5.0
氯化鈣	0.05
MUG	0.075
硫酸鋅	0.0005
PH	7.3±0.125℃

 

此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成分以獲得最佳的結(jié)果

注:本培養(yǎng)基有少許沉淀。

三、操作步驟

1、稱取本品23. 37g，加熱攪拌溶解于 1000m1純化水中， 分裝試管，每管5ml, 115C高壓滅菌20分鐘,備用。

2、制備質(zhì)控菌液。

3、把質(zhì)控菌液加入試管中。

4、在30-35C培養(yǎng)5-24小時(shí),先置于36m波長紫外燈下觀察有無熒光,再滴加靛基質(zhì)試劑觀察有無玫紅色環(huán)出現(xiàn)。

注:靛基質(zhì)試劑為強(qiáng)酸性,滴入后會破壞水解生成的4-甲基傘形酮，導(dǎo)致在紫外燈下失去熒光，因此觀察試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，需先觀察熒光，再加入試劑觀察靛基質(zhì)反應(yīng)。

四、試驗(yàn)現(xiàn)象

接種以下質(zhì)控菌株,在30-35C培養(yǎng)5- 24小時(shí):

質(zhì)控菌株	菌株編號	接種量(CFU)	生長情況	其他特征
大腸埃希氏菌	CMCC(B)44102	>5000	+++	有熒光，靛基質(zhì)陽性
大腸埃希氏菌	AT0C25922	>5000	+++	有熒光，靛基質(zhì)陽性
金黃色葡萄球菌	CMCC(B)26003	>5000	-	/
陰溝腸桿菌	ATCC22955	>5000	+++	無熒光，靛基質(zhì)陰性

備注:左為366nm紫外燈下拍攝，右為滴加靛基質(zhì)試劑后拍攝;

a:大腸埃希氏菌CMCC(B)44102 b: 大腸埃希氏菌ATCC25922

c:陰溝腸桿菌

d:金黃色葡萄球菌

 

MUG培養(yǎng)基的微生物靈敏度試驗(yàn)

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置30-35℃需氧培養(yǎng)5-24小時(shí)。

質(zhì)控菌株	菌株編號	接種量(CFU)	生長情況	其它特征
天腸埃希氏菌	7CMCC(B)44102	10-100	+++	有熒光，靛基質(zhì)陽性
金黃色葡萄球菌	CMCC(B)26003	10-100	-	/

產(chǎn)品信息
[重量]	100g
[顏色]	白色
危險(xiǎn)性類別
[危險(xiǎn)性類別]	非危險(xiǎn)品