形成吡咯檢測琥珀酸的試驗(yàn)法
琥珀酰亞胺和金屬鋅同受干熱時(shí)會(huì)形成吡咯(鋅粉蒸餾法)。琥珀酸銨由于干熱時(shí)會(huì)轉(zhuǎn)變成琥珀酰亞胺,其性行正相類似:
從反應(yīng)(1)和(2)的連續(xù)過程中所產(chǎn)生的吡咯,可在蒸氣相中,由其和對-二甲胺基苯(甲)醛的酸性溶液所產(chǎn)生的紅-紫色來作出檢定。因此琥珀酸的試驗(yàn)法就可用這顯色反應(yīng)作為基礎(chǔ)。
為了要達(dá)到最大的靈敏度,鋅粉蒸餾法應(yīng)在有氯化銨存在之下進(jìn)行,而以使用對-二甲胺基苯(甲)醛的三氯醋酸溶液勝于使用其鹽酸溶液。氯化銨可以通過反應(yīng):
ZnO+2NH4Cl → ZnCl2+H2O+2NH3
使氧化鋅膜從金屬鋅的表面上除掉,因而使反應(yīng)(2)順利地進(jìn)行。利用三氯醋酸(沸點(diǎn)197°)代替鹽酸的水溶液(沸點(diǎn)110°),可以保証吡咯反應(yīng)中有一熱穩(wěn)定介質(zhì),這是鹽酸溶液所不可能的,因?yàn)殇\粉蒸餾是需用高溫的。
値得注意的是琥珀酸在和氯化銨與鋅受干熱時(shí)也會(huì)產(chǎn)生吡咯,因而它的性行和琥珀酸銨及琥珀酰亞胺相似,亞胺是在燒結(jié)反應(yīng)中通過琥珀酸銨來形成的:
因此,有可能在有氯化銨存在之下,用鋅粉蒸餾法來形成吡咯,以檢定琥珀酰亞胺與琥珀酸。
操作手續(xù) 用一微量試管,將試液一滴或固體的一小部份和0.5%氯化銨溶液一滴及鋅粉數(shù)毫克一起蒸發(fā)至干。管口蓋以一小片曾用5%對-二甲胺基苯(甲)醛在20%三氯醋酸苯溶液中的溶液潤濕過的濾紙。用微焰在試管底部強(qiáng)烈加熱約1分鐘。視琥珀酸或琥珀酰亞胺的量,紙上將出現(xiàn)紅-紫或粉紅色斑點(diǎn)。
鑒定限度:5微克 琥珀酸
上述試驗(yàn)不能直接用于有蘋果酸或草酸存在時(shí)。蘋果酸在所規(guī)定的條件下會(huì)形成揮發(fā)的羥基吡咯,對于對-二甲胺基苯(甲)醛的性行和其母體化合物相似。草酸和氯化銨一起干熱時(shí),起初形成草酸銨,然后形成草酰胺。草酰胺被初生態(tài)氫還原成乙(撐)二胺,而在熱解時(shí)也會(huì)產(chǎn)生吡咯。
用β-萘酚和硫酸檢測蘋果酸的試驗(yàn)法
蘋果酸HOOC?CHOH?CH2?COOH和含少許β-萘酚的濃硫酸加熱時(shí),發(fā)出藍(lán)色的螢光。這個(gè)反應(yīng)的化學(xué)原理尚未明了??赡苁翘O果酸被濃硫酸分裂(磷酸的性行相似)而產(chǎn)生一種醛,然后再和β-萘酚縮合。
下列諸酸不起干擾:草酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸、肉桂酸、苯(甲)酸、水楊酸、醋酸、甲酸。數(shù)種羥基酸,如乙醇酸及酒石酸會(huì)引起強(qiáng)弱不同的綠色螢光。
操作手續(xù) 如在兼含檸檬酸、酒石酸、草酸、琥珀酸等鈣鹽的混合沉淀中檢定蘋果酸根離子,可取沉淀少許或其稀硫酸的溶液一滴(硫酸鈣可借過濾或離心法移去)提供試驗(yàn)。試料可用β-萘酚試劑一毫升處理,并在水浴上加熱片時(shí),如有蘋果酸存在,出現(xiàn)黃的顏色和藍(lán)色的螢光。
如用蘋果酸或其鹽類的稀溶液時(shí),最好加入草酸鹽少許,然后加入醋酸鈣。草酸鈣沉淀的功用為微量蘋果酸鈣的收集劑。如蘋果酸的含量不是太小,即使有硫酸鈣存在,在β-萘酚作用后所發(fā)生的螢光,肉眼仍能見到。
試劑:0.0025克β-萘酚在100毫升96%硫酸中的溶液。
鑒定限度:10微克 蘋果酸