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       1，2－二酮類(lèi)的濃硫酸溶液和噻吩縮合，可產(chǎn)生有色醌型化合物，即所謂靛吩嚀。根據(jù)這個(gè)性行的1，2－二酮類(lèi)試驗(yàn)法，倒過(guò)來(lái)就是這里所述的噻吩試驗(yàn)法。

和靛紅縮合的試驗(yàn)法
       溶解于濃硫酸中的靛紅（Ⅰ），可和噻吩（Ⅱ）縮合，這是與兩個(gè)噻吩分子互相聯(lián)合有關(guān)的一種反應(yīng)：

       濃硫酸在此處的功用，不僅僅是脫水劑。這一看法是可以獲得事實(shí)支持的：糖漿狀磷酸在許多縮合過(guò)程中是可以代替濃硫酸的，但在此處并不會(huì)形成靛吩嚀。這個(gè)染料的形成，也許需要噻吩被濃硫酸磺化與氧化而成為α，α'－聯(lián)（二）噻嗯（Ⅵ）。往往有人建議，將痕量硝酸加到靛紅-硫酸中，但這個(gè)設(shè)計(jì)并無(wú)必要，特別在反應(yīng)用溫?zé)醽?lái)進(jìn)行時(shí)。

       β－甲基噻吩（Ⅳ）、β，β'－二甲基噻吩（Ⅴ）、α，α'－聯(lián)（二）噻嗯（Ⅵ）及并噻吩（Ⅶ）也和靛紅發(fā)生相似的縮合，而產(chǎn)生藍(lán)色染料。由于α，β'－二甲基－噻吩及α，α'－二甲基－噻吩都無(wú)反應(yīng)，則和靛紅的縮合似系在噻吩及噻吩同系物的α，α'－或α，β－位置上發(fā)生，如靛吩嚀（Ⅲ）的結(jié)構(gòu)式所示。

       靛吩嚀反應(yīng)，可在一滴試板上，一瓷質(zhì)微量坩堝中，或一微量試管中作為點(diǎn)滴反應(yīng)來(lái)進(jìn)行。應(yīng)注意到，在有色溶液中很難看出淺藍(lán)色，且許多無(wú)色有機(jī)化合物在濃硫酸中也會(huì)給出有色溶液。這些干擾，可利用下面的事實(shí)來(lái)防止；即噻吩在84°沸勝，當(dāng)它的蒸氣和靛紅溶液接觸時(shí)，靛吩嚀反應(yīng)就很迅速地發(fā)生。
       操作手續(xù)    用試驗(yàn)專(zhuān)用儀器，將試液（在無(wú)噻吩的苯等中的溶液）一滴，置于它的球部?jī)?nèi)，并將塞子的球頭浸漬于黃色試劑中。蓋好儀器，放在80～90°的烘箱內(nèi)。如有噻吩存在，懸滴在1～2分鐘內(nèi)變成藍(lán)色；其色的強(qiáng)度以噻吩的量為轉(zhuǎn)移。
       試劑：0．2％靛紅在濃硫酸中的溶液。
       鑒定限度：1．5微克  噻吩
       靛吩嚀反應(yīng)如在0．2％苯偶酰濃硫酸溶液中進(jìn)行，就不需要加熱。依此方式可檢定出5微克噻吩。
和水合茚滿三酮縮合的試驗(yàn)法
       上面試驗(yàn)法所述的噻吩顯色反應(yīng)，涉及采用溶于濃硫酸中1，2－二酮類(lèi)的縮合反應(yīng)，其中濃硫酸的功用兼似脫水劑與氧化劑。在開(kāi)鏈或閉鏈的碳鏈中含有兩個(gè)毗鄰CO基團(tuán)的多酮類(lèi)，似亦可能和噻吩形成醌型染料。水合茚滿三酮的性行，加強(qiáng)了這個(gè)假設(shè)。這個(gè)三酮在濃硫酸中，即使是很稀的溶液，加入痕量的噻吩后，幾乎立即現(xiàn)出紅色。這個(gè)紅色染料濃度較大時(shí)為深紫色，可能是由于一個(gè)類(lèi)似的連續(xù)反應(yīng)所形成，并且可能與那些由噻吩與靛紅或苯偶酰發(fā)生反應(yīng)所形成的染料具有類(lèi)似的結(jié)構(gòu)。
       和水合茚滿三酮的顯色反應(yīng)是如此地靈敏，以致一般認(rèn)為不含噻吩的精制苯，在加入溶于硫酸的水合茚滿三酮時(shí)，常會(huì)給出蒼白而仍可辨認(rèn)的粉紅色。
       如果使用上個(gè)試驗(yàn)法中所述的懸滴法，則水合茚滿三酮溶液在室溫下，可檢出3微克噻吩。在80～90°時(shí)，這個(gè)試劑將失去其活性。按下列指示可獲得良好的結(jié)果。
       操作手續(xù)    用一滴試板或一微量試管，置一滴新配的0．01％水合茚滿三酮在濃硫酸中的溶液，蓋以試液一滴，視噻吩的量，現(xiàn)出深紫至粉紅色。
       鑒定限度：0．2微克  噻吩