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 溶菌酶

中文名稱    溶菌酶

中文同名    脆壁質酶，溶菌酶,雞蛋白

英文名稱    lysozyme from human neutrophils

化學式       C125H1961N40O36S2

分子量       2899.27

CAS編號   12650-88-3

質檢信息

質檢項目      指標值

含量，%       ≥40000U/mg

PSA：         1406.02000

LOGP：      14.96760

密度  1.725 g/cm3

沸點  400.5°C at 760 mmHg

熔點  185-187?°C(lit.)

閃點  210.1°C

折射率 -180 ° (C=1, H2O)

蒸氣壓 4.45E-08mmHg at 25°C

水溶性 18 g/100 mL (20 oC)

化學特性

溶菌酶,雞蛋白用作白色或微白色凍干粉,溶于水，不溶于乙醚和丙酮。酸性介質中可穩(wěn)定存在，堿性介質中易失活。

產品用途

1.溶菌酶,雞蛋白用于生化研究，臨床上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。 

2.生化研究。是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過破壞細胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵，使細胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，導致細胞壁破裂內容物逸出而使細菌溶解。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結合，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復鹽，使病毒失活?？煞纸馊鼙谖⑶蚓?、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽性菌。

3.要用于五官科多種粘膜炎癥如副鼻竇炎、慢性鼻炎、急慢性咽喉炎、扁平苔癬、口腔潰瘍、滲出性中耳炎，以及皮膚科如帶狀皰疹、扁平疣、水痘等，亦用于哮喘性氣管炎、潰瘍性結腸炎、腮腺炎等。本品與抗菌藥物同用效果更好。

4.溶菌酶具有破壞細菌細胞壁結構的功能，用溶菌酶處理G+細菌可以在破壞細胞壁后得到原生質體，所以廣泛用于生物技術中，成為基因工程、細胞工程中細胞融合操作必不可少的工具酶。

5.針對溶菌酶無毒、無害的特性，同時對G+細胞壁的分解作用，應用于水產品和肉類制品中，在保證食品原有營養(yǎng)成分不受損失的前提下，可以對水產品和肉類制品起到保鮮和防腐作用；利用溶菌酶與氯化鈉和亞硝酸鹽聯(lián)合應用，可以延長肉制品的保質期，其防腐效果比單獨使用時效果更好；試驗用0.05%的溶菌酶與植酸聚合磷酸鹽、甘氨酸等配合使用，作為防腐劑和保鮮劑可以對海產品和水產品延長儲存期。

6.奶油蛋糕是容易腐敗變質的食品之一，在糕點中加入溶菌酶，可防止微生物引起的腐敗變質現(xiàn)象發(fā)生；將溶菌酶應用于食物的保鮮中，其效果也極為明顯。同時根據(jù)溶菌酶無毒、無害且有保健作用，有抗感染和增強抗生素的效力，以及促進血液凝固及止血和組織再生作用，現(xiàn)在有人嘗試在食品中作為添加劑增強食物的保健功效。

 

儲藏措施

1.儲存于陰涼、通風的庫房。

2.應與氧化劑、食用化學品分開存放，切忌混儲。

3.保持容器密封。

4.遠離火種、熱源，防止陽光直射。

5.庫房必須安裝避雷設備。

6.排風系統(tǒng)應設有導除靜電的接地裝置。

7.采用防爆型照明、通風設置。

8.禁止使用易產生火花的設備和工具。

9.儲區(qū)應備有泄漏應急處理設備和合適的收容材料。

10.防止粉塵和氣溶膠生成。

急救措施 

【食入】攝入不可能。但是，如果攝入，獲得緊急醫(yī)療照顧。

【吸入】如果克服被曝光，將受害人轉移到空氣新鮮處。給予吸氧或人工呼吸。獲得緊急醫(yī)療照顧。迅速采取行動是至關重要的。

【皮膚】立即脫去污染的衣著。徹底清洗皮膚，用溫和的肥皂/水。W /溫水沖洗15分鐘。如果是粘的，首先使用無水清潔。尋求醫(yī)療照顧，如果不良影響或刺激。

【眼睛】眼睛接觸的情況下，立即用清水沖洗20-30分鐘。經常收回眼皮。獲得緊急醫(yī)療照顧。

生產方法

一、以蛋清為原料，在pH6.5條件下用弱酸性陽離子交換樹脂732吸附后，再用硫酸銨洗脫，經透析后冷凍干燥得產品。

二、本發(fā)明的上述技術目的是通過以下技術方案得以實現(xiàn)的：一種溶菌酶制劑，包括溶酶菌A試劑，所述溶酶菌A試劑中有效成分為溶菌酶提純液與硅油在高速攪拌下形成的溶酶菌-殼聚糖-硅油。

作為優(yōu)選，還包括以下組分，以下組分按照重量計：

作為優(yōu)選，所述溶酶菌-殼聚糖-硅油的制備方法主要包括以下步驟：

步驟1，蛋液分離：去除蛋黃，去除雜質；

步驟2，預備液制備，將二氧化硅作為制孔劑，混入高分子殼聚糖中，制備得到殼聚糖多孔膜：將殼聚糖溶解在低濃度的乙酸溶液中形成殼聚糖-乙酸溶液，將殼聚糖-乙酸溶液逐滴添加至液體石蠟中，滴加過程中持續(xù)攪拌，滴加完畢后高速攪拌至乳化；將低濃度戊二醛溶液與堿性二氧化硅混合并逐滴滴加至混合溶液中，攪拌至完全混合后，離心過濾5-8min，去除上層清液，將下層淡黃色沉淀收集，多次洗滌得到純凈物后，凍干研磨成粉；

步驟3：將預備液體與步驟1中制備的蛋液在微酸性環(huán)境下混合，靜置24-48h后，離心8-15分鐘后去除上層清液取下層沉淀；

步驟4：將鹵代硅烷與有機溶劑混合后逐滴滴加至步驟3中下層沉淀中，攪拌并升溫至50-58℃，攪拌10-20h后，減壓蒸餾/減壓干燥得到高濃度溶酶菌-殼聚糖-硅油復合物質；

步驟5：多次洗滌后收集。

作為優(yōu)選，所述步驟3中微酸環(huán)境為偏磷酸鈉水溶液，所述步驟4中有機溶劑為DMA。

作為優(yōu)選，還包括輔助制劑A，所述輔助制劑A包括青刺果油提取物、玫瑰花油提取物、白蘭花油提取物；所述溶菌酶A試劑與輔助制劑A混合形成凈化精油。

作為優(yōu)選，還包括輔助制劑B，所述輔助制劑B包括葛根提取物、大豆異黃酮提取物、植物胎盤液；所述輔助制劑B與溶菌酶A制劑混合形成凈化精華。

作為優(yōu)選，還包括輔助制劑C，所述輔助制劑C包括蜂膠提取物、薄荷腦、尿囊素；所述輔助制劑C和溶菌酶A制劑混合形成凈化霜。

作為優(yōu)選，將所述凈化精油、凈化凈化或凈化霜均勻涂抹在身體淋巴系統(tǒng)所在位置后配合按摩手法按摩直至吸收。

制備方法

溶菌酶是采用生物工程技術進行克隆、提取而制取,它是一種天然酶，安全綠色的添加劑，無抗藥性。

該酶廣泛存在于人體多種組織中，鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個氨基酸殘基構成的單一肽鏈。它富含堿性氨基酸，有4對二硫鍵維持酶構型，是一種堿性蛋白質，其N端為賴氨酸，C端為亮氨酸。可分解溶壁微球菌、巨大芽孢桿菌、黃色八疊球菌等革蘭陽性菌。溶菌酶在等電點以下較廣泛的pH值范圍內，分子帶正電荷，可吸附于弱酸性陽離子交換樹脂上，洗脫后鹽析，可得溶菌酶沉淀，再進行精制可得成品。蛋清吸附↓724樹脂洗滌↓緩沖液洗脫↓硫酸銨溶液鹽析透析去堿性蛋白↓NaOH凍干溶菌酶凍干粉沉淀干燥溶菌酶在5～10℃下，將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg 724樹脂中，攪拌吸附6h，在0～5℃靜置過夜。傾出上層蛋清，樹脂離心甩干，用蒸餾水反復洗去黏附的卵蛋白，然后將樹脂裝入柱內，用0?15mol/L、pH=6?5磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹脂，再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨，使最終含硫酸銨量為40%，有白色沉淀生成，冷處放置過夜。虹吸上層清液，沉淀吸濾抽干，再用1倍蒸餾水溶解沉淀呈稀糊狀，然后裝入透析袋，在約5℃的條件下，對蒸餾水透析24h左右，中間換水2～3次。離心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次，洗液與離心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氫氧化鈉溶液，同時不斷攪拌，使pH值上升到8?0～9?0，如有白色沉淀，即離心除去。然后用3mol/L鹽酸調pH=5?0，冷凍干燥，即得白色片狀溶菌酶。也可將離心液用3mol/L鹽酸調pH=3?5，在攪拌下緩慢加入5%的固體氯化鈉，在約5℃的溫度下靜置48h，離心，沉淀用0℃丙酮洗滌，干燥，即得溶菌酶。

作用機理

溶菌酶對革蘭氏陽性菌、好氣性孢子形成菌、枯草桿菌、耐輻射微球菌均有良好的分解作用,對大腸桿菌、普通變球菌和副溶血性弧菌等革蘭氏陰性菌也有一定程度的溶解作用。溶菌酶具有分解細菌細胞壁中肽聚糖的特殊作用。細菌的細胞壁由胞壁質組成,胞壁質是由Ｎ-乙酰氨基葡萄糖及Ｎ-乙酰胞壁酸交替組成的多聚物,胞壁酸殘基上可以連接多肽,稱為肽聚糖。多糖以直鏈形式存在,彼此鄰近的多糖鏈之間可以通過肽鏈部分相互連接,從而形成三維結構。酶的活性中心是天門冬氨酸和谷氨酸,溶菌酶通過其肽鍵中第35位的谷氨酸和第52位的天門冬氨酸構成的活性部位水解破壞組成微生物細胞壁肽聚糖分子的Ｎ-乙酰胞壁酸(NAM)與Ｎ-乙酰葡萄糖氨(NAG)之間的β-1,4糖苷鍵,使細胞因滲透壓不平衡引起破裂,從而導致菌體細胞壁溶解而起到殺死細菌(尤其是球菌)的目的。

概述

溶菌酶(LZM)，N-乙酰胞壁胺聚糖水解酶，一種水解細胞壁肽聚糖，能使一些細菌溶解的堿性蛋白酶。由129個氨基酸殘基組成，有4對鏈間雙硫鍵形成穩(wěn)定的分子構型。含有多種氨基酸，特別是含有大量的精氨酸、賴氨酸和亮氨酸。存在于唾液、眼淚、汗液、乳汁、腸分泌物、蛋清和臟器組織液中，在吞噬細胞的溶酶體中亦大量存在。它能使革蘭陽性菌細胞壁的肽聚糖中乙酰葡糖胺和乙酰胞壁酸之間的1，4-β-糖苷鍵斷裂，使細胞壁形成很多空洞，導致菌體溶解死亡。革蘭陰性菌在細胞壁肽聚糖外面有一層脂多糖和脂蛋白，因不易受溶菌酶作用。但溶菌酶能促進和協(xié)助抗體——補體的溶菌作用，從而增強其殺菌作用。在吞噬細胞的溶酶體中含有豐富的溶菌酶，是吞噬細胞在發(fā)揮吞噬作用時的一種有力武器。此外，大多數(shù)凝固酶陽性和若干凝固酶陰性的金黃色葡萄球菌也會產生一種與溶菌酶類似的胞外酶，稱作內-β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶(EC 3.4.99.17)，它可水解肽聚糖分子中的葡糖胺酰-(1→4)-β-鍵。

優(yōu)點

1．溶菌酶是很穩(wěn)定的蛋白質，有較強的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的最耐熱的酶；

2．溶菌酶不會因為有機溶劑的處理而失活，當轉移到水溶液中時，溶菌酶的活力可全部恢復；

3．溶菌酶可被冷凍或干燥處理，且活力穩(wěn)定；

4．溶菌酶適宜pH5.3~6.4，可用于低酸性食品防腐；

5．溶菌酶生產成本較低；

6．溶菌酶的抗菌譜較廣，不僅局限于G- 菌，對部分G+菌也有抑制效果；

7．溶菌酶作為防腐劑安全性高。溶菌酶是一種天然蛋白質，1992年FAO/WTO 的食品添加劑協(xié)會已經認定溶菌酶在食品中應用是安全的。

副作用

偶有較輕的過敏反應。氯化溶菌酶醫(yī)療效果更廣，有濃痰分散、出血抑制、組織修復、消炎鎮(zhèn)痛、抗過濾性病毒等作用，因而用氯化溶菌酶的制藥有消炎消痔、治感冒、皮膚病及眼、鼻、喉等用藥.

產品信息
[顏色]	白色
[重量]	5g
危險性類別
[危險性類別]	非危險品