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 鴨嘴花酚堿

 

中文名稱     鴨嘴花酚堿

中文同名     鴨嘴花酚堿

英文名稱     VASICINOL

化學式        C11H12N2O2

分子量        446.4

CAS編號    5081-51-6

質(zhì)檢信息

熔點 192-195 °C(lit.) 

沸點 360°C (rough estimate) 

密度 1.2170 (rough estimate) 

折射率 1.5500 (estimate)

化學特性

1.粉末

產(chǎn)品用途

1.含量測定

 

儲藏措施

1.儲存于陰涼、通風的庫房。

2.應與氧化劑、食用化學品分開存放，切忌混儲。

3.保持容器密封。      

4.遠離火種、熱源，防止陽光直射。

5.庫房必須安裝避雷設備。

6.排風系統(tǒng)應設有導除靜電的接地裝置。

7.采用防爆型照明、通風設置。

8.禁止使用易產(chǎn)生火花的設備和工具。

9.儲區(qū)應備有泄漏應急處理設備和合適的收容材料。

10.防止粉塵和氣溶膠生成。

急救措施 

【食入】攝入不可能。但是，如果攝入，獲得緊急醫(yī)療照顧。

【吸入】如果克服被曝光，將受害人轉(zhuǎn)移到空氣新鮮處。給予吸氧或人工呼吸。獲得緊急醫(yī)療照顧。迅速采取行動是至關(guān)重要的。

【皮膚】立即脫去污染的衣著。徹底清洗皮膚，用溫和的肥皂/水。W /溫水沖洗15分鐘。如果是粘的，首先使用無水清潔。尋求醫(yī)療照顧，如果不良影響或刺激。

【眼睛】眼睛接觸的情況下，立即用清水沖洗20-30分鐘。經(jīng)常收回眼皮。獲得緊急醫(yī)療照顧。

一種從鴨嘴花中提取高純度總生物堿的方法與流程

鴨嘴花又叫大還魂、大駁骨、大接骨等，為爵床科鴨嘴花屬常綠灌木，主要分布于亞洲東南部，在我國廣東、廣西、海南、澳門、香港、云南等地有產(chǎn)，或栽培，或野生。該植物主要特征是：大灌木，高達1-3米；枝圓柱狀，灰色，有皮孔，嫩枝密被灰白色微柔毛。葉紙質(zhì)，矩圓狀披針形至披針形，或卵形或橢圓狀卵形，長15-20厘米，寬4.5-7.5厘米，頂端漸尖，有時稍呈尾狀，基部闊楔形，全緣，上面近無毛，背面被微柔毛；中脈在上面具槽，側(cè)脈每邊約12條；葉柄長1.5-2厘米。莖葉揉后有特殊臭氣。穗狀花序卵形或稍伸長；花梗長5-10厘米；苞片卵形或闊卵形，長1-3厘米，寬8-15毫米，被微柔毛；小苞片披針形，稍短于苞片，萼裂片5，矩圓狀披針形，長約8毫米；花冠白色，有紫色條紋或粉紅色，長2.5-3 厘米，被柔毛，冠管卵形，長約6毫米；藥室橢圓形，基部通常有球形附屬物不明顯。蒴果近木質(zhì)，長約0.5厘米，上部具4粒種子，下部實心短柄狀。

鴨嘴花是傳統(tǒng)中藥材，全株切段、曬干或鮮用入藥，是我國華南地區(qū)使用的地方藥材大駁骨，也是云南省西雙版納等地區(qū)的傳統(tǒng)傣族醫(yī)藥。中醫(yī)認為其味辛、微苦、性平，歸肝、脾經(jīng)；有祛風活血、散瘀止痛、接骨續(xù)傷等功效。臨床上主治筋骨傷折，扭傷，淤血腫痛，風濕痹病，腰痛，月經(jīng)過多，崩漏，內(nèi)服或外用均可。

鴨嘴花化學成分主要含有生物堿類和黃酮類化合物，也含有多種糖苷類和多糖類化合物以及揮發(fā)油成分，其中以生物堿類化合物為主，包括鴨嘴花酚堿(Vasicinol)、鴨嘴花醇堿 (Vasicol)、去氧鴨嘴花酮堿(Deoxyvasicinone)、鴨嘴花酮堿(Vasicinone)、鴨嘴花堿(Vasicine)、去氧鴨嘴花堿(Deoxypeganine)、脫氫鴨嘴花堿(Vaskin)、羥基駱駝蓬堿(Hydroxypenganine)、甜菜堿(Betaine)、鴨嘴花考林堿(Vasicoline)、鴨嘴花考林酮堿(Vasicolinone)、安妮索堿 (Anisotine)、鴨嘴花定堿(Adhatodine)和大駁骨酮堿(Adhavasinone)。在每年不同生長時期，其生物堿含量和組分存在差異，生物堿的總含量約2％(無水生物堿)，在8～10月份時，鴨嘴花堿約占95％，在微量生物堿中約有3％去氧鴨嘴花堿和痕跡量的鴨嘴花酮堿。

現(xiàn)代醫(yī)學研究證明，鴨嘴花堿有顯著的子宮興奮作用有顯著的局部麻醉作用；可減弱心肌收縮力，減少冠脈流量、輕度降低血壓；對支氣管有強的擴張作用，特別對組胺所致支氣管收縮有顯著的解痙作用，但較腎上腺素弱；對金黃色葡萄球菌、志賀菌、變形桿菌和傷寒桿菌等有中度抗菌作用；脫氫鴨嘴花堿對實驗動物無顯著毒性。目前，國外對鴨嘴花的研究較多，印度用含有鴨嘴花提取物的制劑治療哮喘，德國HF醫(yī)藥研究有限公司就去氧鴨嘴花堿及其鹽在我國申請了3項專利，用以治療抑郁癥(尤其是與癡呆、酒精或尼古丁濫用有關(guān)的抑郁癥)、精神分裂性精神病以及治療大腦、中樞神經(jīng)機能喪失或失調(diào)；國內(nèi)對鴨嘴花的研究報道卻較少。國外，鴨嘴花在印度應用較多，常被用于治療呼吸系統(tǒng)方面的疾病，如咳嗽、感冒、哮喘、支氣管炎、肺結(jié)核等。

現(xiàn)階段，研究提取總生物堿的方法有很多，但是提取高純度總生物堿的方法并不多， CN103393780A一種高純度黃連總生物堿提取方法采用硫酸溶液浸泡提取，經(jīng)石灰或氫氧化鈣進中和和氯化鈉沉淀得到總生物堿，最后經(jīng)大孔樹脂純化得到高純度黃連總生物堿； CN105726640A一種高純度荷葉總生物堿提取物的制備方法與用途，用稀鹽酸溶液浸提，過濾，過強酸型陽離子交換樹脂，陰干后用氨水潤濕，以乙醇回流提取，提取液減壓濃縮、干燥得總生物堿提取物。

目前有關(guān)提取鴨嘴花總生物堿的研究較少，而從鴨嘴花中提取高純度總生物堿的研究未見報道，本發(fā)明經(jīng)微生物發(fā)酵有效的減少了纖維素和淀粉類物質(zhì)對提取的干擾，再用乙醇溶液提取、過濾、脫脂、減壓濃縮、親和層析、離子交換層析、結(jié)晶，制得鴨嘴花總生物堿的純度較高，也提高了總生物堿的提取效率，這將為天然植物資源利用和中藥利用的現(xiàn)代化提供更好的基礎。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的就是要提供一種方法能夠從鴨嘴花中提取高純度鴨嘴花堿的方法，其特點是方法簡單、成本低、便于工業(yè)化生產(chǎn)、所得總生物堿純度高等特點的方法：經(jīng)微生物發(fā)酵后，再用乙醇溶液提取、過濾、脫脂、減壓濃縮、親和層析、離子交換層析、結(jié)晶，制得鴨嘴花總生物堿純品。

本發(fā)明采用的微生物菌種，糙孢曲霉(Aspergillus asperescens)來源于中國普通微生物菌種保藏管理中心，編號分別為CGMCC No.3.4369。

為達到上述目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

1、于每年8～10月采集鴨嘴花鮮葉，曬干，粉碎，過20目篩，加入5-10％糙孢曲霉培養(yǎng)液，在28～30℃條件下好氧固體發(fā)酵3～5天。

2、在20～40℃下，用質(zhì)量分數(shù)為60％～80％的乙醇超聲提取3次，每次30min，用陶瓷膜過濾，3次濾液合并，減壓回收乙醇，得到總生物堿的粗制浸膏，并于50℃下干燥；將干燥物用石油醚進行浸提，陶瓷膜過濾得濾渣，濾液在50℃下減壓濃縮回收石油醚。

3、用pH＝9的堿性水溶解濾渣，用陶瓷膜過濾，濾液用大孔樹脂純化，用去離子水、 pH＝5的質(zhì)量分數(shù)80％的乙醇洗脫，減壓濃縮得到總生物堿浸膏；

4、用酸性乙醇(乙醇2mL，0.5N鹽酸30mL)溶解浸膏，用陶瓷膜過濾，濾液用強酸性陽離子樹脂DOWEX 50WX2純化，用去離子水、含氨水濃度為2.0N的30％-80％線性梯度乙醇溶液對樹脂吸附的生物堿成分進行洗脫，收集乙醇洗脫部分，減壓濃縮得到高純度總生物堿浸膏。

5、上述濃縮浸膏用無水乙醇重結(jié)晶，用熱乙醇溶解結(jié)晶，加活性炭脫色，用陶瓷膜過濾，得到純度大于95％的鴨嘴花堿。

所述過濾過程都是采用陶瓷膜過濾，膜孔孔徑大小為0.22μm。

技術(shù)效果

1、本發(fā)明的工藝方法簡單，極大的降低了鴨嘴花中總生物堿的生產(chǎn)成本，簡化了生產(chǎn)過程，可從鴨嘴花中得到高純度的總生物堿；

2、該工藝過程中的樹脂、溶劑、洗脫劑均可重復使用，工藝成本低，易于工業(yè)化生產(chǎn)。

3、采用曲霉進行發(fā)酵處理，有效降低了鴨嘴花中淀粉和纖維對提取總生物堿的影響，提高了總生物堿的溶出率，也能有效提高總生物堿的產(chǎn)量。

4、采用乙醇提取和柱層析方法快速獲得包括鴨嘴花堿、鴨嘴花酮堿、鴨嘴花酚堿、鴨嘴花醇堿、去氧鴨嘴花酮堿等多種活性生物堿，生物效價更高，資源利用更充分。

5、采用離子交換層析純化總生物堿可進一步提高總生物堿的純度。

6、采用醇浸提后所得到發(fā)酵廢渣可直接用于肥料的制備，降低了向環(huán)境排放廢棄物的可能。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明，以下實施例旨在說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的進一步限定。

實施例1

粉碎已干燥好的鴨嘴花莖葉原料至10目～20目，稱取100Kg，加入10L糙孢曲霉培養(yǎng)液，在28～30℃條件下好氧固體發(fā)酵3～5天。發(fā)酵后鴨嘴花中加入60～80％乙醇800L，于常溫下超聲提取3次，每次30min，三層紗布過濾兩次、陶瓷膜過濾一次，合并濾液，50℃下減壓濃縮獲得干燥物4.22kg；將干燥物用石油醚進行浸提，陶瓷膜過濾一次，濾液在50℃下減壓濃縮回收石油醚；得濾渣3.71kg，加入pH＝9的堿性水溶解，陶瓷膜過濾一次，濾液上大孔吸附樹脂D101進行吸附分離，并將收集的80％乙醇相洗脫物減壓濃縮干燥，減壓濃縮獲得干燥物2.36kg；加入乙醇含量為70％的酸性乙醇水溶液使之充分溶解，用陶瓷膜過濾，濾液用強酸性陽離子樹脂DOWEX 50WX2純化，用去離子水、含氨水濃度為2.0N的 30％-80％線性梯度乙醇溶液對樹脂吸附的生物堿成分進行洗脫，收集乙醇洗脫部分，減壓濃縮干燥得到高純度總生物堿干燥物2.11kg。加入乙醇含量為70％的酸性乙醇水溶液，再加入 10L的水；將含有總生物堿的乙醇溶液放置在4℃過夜結(jié)晶，得到淡黃色晶體，抽濾，得到總生物堿粗品，重結(jié)晶得到總生物堿2043g純品。

高效液相色譜(HPLC)分析結(jié)果表明，產(chǎn)品中總生物堿含量93％，其中鴨嘴花堿含量 92％，其他生物堿含量6.5％；鴨嘴花總生物堿的收率94％。

對照實施例

粉碎已干燥好的鴨嘴花莖葉原料至10目～20目，稱取100Kg，加入60～80％乙醇800L，于常溫下超聲提取3次，每次30min，三層紗布過濾兩次、陶瓷膜過濾一次，合并濾液，50℃下減壓濃縮獲得干燥物3.9kg；將干燥物用50L的石油醚進行浸提，陶瓷膜過濾一次，濾液在50℃下減壓濃縮回收石油醚；得濾渣3.42kg，加入3.5L pH＝9的堿性水溶解，陶瓷膜過濾一次，濾液上大孔吸附樹脂D101進行吸附分離，并將收集的30％乙醇相洗脫物減壓濃縮干燥，減壓濃縮獲得干燥物2.17kg；加入乙醇含量為70％的酸性乙醇水溶液使之充分溶解，用陶瓷膜過濾，濾液用強酸性陽離子樹脂DOWEX 50WX2純化，用去離子水、含氨水濃度為2.0N的30％-80％線性梯度乙醇溶液對樹脂吸附的生物堿成分進行洗脫，收集乙醇洗脫部分，減壓濃縮干燥得到高純度總生物堿干燥物1.94kg。加入乙醇含量為70％的酸性乙醇水溶液，再加入10L的水；將含有總生物堿的乙醇溶液放置在4℃過夜結(jié)晶，得到淡黃色晶體，抽濾，得到總生物堿粗品，重結(jié)晶得到總生物堿1878g純品。

高效液相色譜(HPLC)分析結(jié)果表明，產(chǎn)品中總生物堿含量93％，其中鴨嘴花堿含量 90％，其他生物堿含量6.2％；鴨嘴花總生物堿的收率81％。

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