轉(zhuǎn)化成五溴丙酮的試驗法
堿金屬高錳酸鹽可使檸檬酸轉(zhuǎn)化成丙酮(撐)二羧酸:
這個氧化作用在進(jìn)行中如有溴存在,將會有無色的五溴丙酮沉淀下來:
這里所述的試驗,也適用于檸檬酸鈣。草酸、酒石酸、蘋果酸、琥珀酸及它們的鹽類都無干擾。和溴反應(yīng)能形成沉淀的有機酸類與酚類,必不可存在。
操作手續(xù) 試液一滴與0.01N KMnO4及飽和的溴水各一滴在一微量試管內(nèi)進(jìn)行混和,并微加溫?zé)?。冷卻后,加入一些固體的磺基水楊酸,使過量的溴與最后形成的MnO2都被破壞。白色的沉淀或混濁出現(xiàn),即是正反應(yīng)的表示。
鑒定限度:6微克 檸檬酸
和脲熔融使轉(zhuǎn)化成檸嗪酸銨的試驗法
檸嗪酸(2,6-二羥吡啶-4-羧酸)可用好幾種方法從檸檬酸制得。它的銨鹽,不論為固態(tài)或溶解態(tài),都有深藍(lán)色螢光,可用以顯示從檸檬酸形成的檸嗪酸。這鹽可由檸檬酸(熔點153°)和脲(熔點130°)在150°下熔融而得。主要是脲在這溫度下轉(zhuǎn)化成縮二脲時所形成的氨:
2CO(NH2)2 → H2NOC-NH-CONH2+NH3
在遇到檸檬酸時,作用似一過熱形態(tài)的氨。其凈反應(yīng)(其中也許以檸檬酸三胺作為中間體)為:
分析上用這反應(yīng)時,在未曾加脲時應(yīng)先測定試樣是否賦有自發(fā)螢光,或熱至150°是否會發(fā)生螢光。酒石酸的量低于500微克時不顯示螢光。其它羥基酸類的性行卻未得到報道。由于藍(lán)色的螢光系因加氨而得,則加入稀無機酸可使檸嗪酸銨的螢光熄滅,就可用作校核了。
操作手續(xù) 試液一滴在微量試管內(nèi)蒸發(fā)至干,也可用固體少許。加脲約100~200毫克,并置試管于預(yù)熱至150°的甘油浴中,保持2分鐘。冷卻后,將凝固的熔體溶于2或3滴水中,在紫外光下檢視其螢光。有必要做一不加脲的空白試驗,及一加1:5鹽酸后螢光溶液性行的試驗。
鑒定限度:2微克 檸檬酸
極其値得注意的是,固體而不熔化的堿金屬、堿土金屬的檸檬酸鹽在進(jìn)行這一手續(xù)時,也會形成藍(lán)色螢光的產(chǎn)物??赡軝庎核岬倪@些相應(yīng)的鹽,是通過固體間的反應(yīng)而形成的,因此,和脲的熔融反應(yīng)也可用來檢定檸檬酸的各種鹽。