固定化酶的穩(wěn)定性
化學(xué)先生 / 2019-08-03
穩(wěn)定性是指固定化酶能否長(zhǎng)期穩(wěn)定操作和反復(fù)回收使用。由于不同催化反應(yīng)體系的操作條件不盡相同,準(zhǔn)確地測(cè)定和比較不同固定化酶的穩(wěn)定性還有一定困難。
目前還找不到酶的固定化方法與穩(wěn)定性之間的一般規(guī)律,用來(lái)預(yù)測(cè)和評(píng)價(jià)固定化酶的穩(wěn)定性。和多相化學(xué)催化劑一樣,必須在最佳反應(yīng)條件下,進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)考察。從已有報(bào)道來(lái)看,大多數(shù)酶經(jīng)固定化后,其穩(wěn)定性都有所提高,這一點(diǎn)對(duì)固定化酶的工業(yè)應(yīng)用非常有利。但也不是所有的酶固定化后,熱穩(wěn)定性都能提高,有的沒(méi)有變化,有的則有所下降。
從固定化方法看,凡采用物理吸附法制備的固定化酶,都有可能導(dǎo)致熱穩(wěn)定性降低,因此要提高酶的熱穩(wěn)定性,采用物理吸附法是不合適的。酶催化劑由于反應(yīng)的活化能更低,比化學(xué)催化劑對(duì)熱更敏感,溫度越高反應(yīng)速率就越快。
但是酶是由蛋白質(zhì)組成的,對(duì)熱的耐受性很差,非常容易引起熱失活,所以適應(yīng)的溫度范圍很窄,般不能在 65攝氏度以上的溫度下操作。
將酶固定化后,其耐熱性能將會(huì)得到改善,特別是采用交聯(lián)法制備的固定化酶,熱穩(wěn)定性可以大大提高。其原因可能是固定化后,酶與載體之間形成了多點(diǎn)連接或酶分子間發(fā)生了交聯(lián),從而防止了酶分子的熱伸展變形,同時(shí)也抑制了分子自降解反應(yīng)(圖8-4)。
固定化酶的穩(wěn)定性,除熱穩(wěn)定性以外,還應(yīng)包括對(duì)各種有機(jī)試劑和酸堿的耐受性,以及長(zhǎng)期儲(chǔ)存的穩(wěn)定性等。