和熔融硫氰酸鉀反應的試驗法
一個脂族和芳族胺類的試驗法,系將它和干燥的硫氰酸鉀熔融,而對其所生成的硫化氫進行檢定。惟這個方法只在施用于各別胺類的鹽時,才能順利進行。這些鹽類原是銨的取代鹽,首先生成硫氰酸的取代銨鹽,加熱之后,才產(chǎn)生被取代的硫脲。后者以其異硫脲型分解為硫化氫及被取代的氨基氰。脂族和芳族的氨基羧酸類以及芳族氨基磺酸類的性行,依照這一概念,應和胺類的鹽相似。含有一個酸性氫(-NH、-OH、-COOH、AsO3H2基團)原子,并在另一位置上有一個堿性氮原子的化合物,都有同樣的性行表現(xiàn),故這些化合物可當作最廣義的氨基酸類論。
下面所述氨基酸類的試驗法,是具有選擇性的,且可在有游離胺類存在下進行。胺的鹽類、銨鹽類、以及固體羧酸類必不可存在。逢有在熔化溫度下會分裂出水的化合物存在時,這個試驗法也不能適用,因過熱的水和硫氰酸鉀反應,就會放出硫化氫。
操作手續(xù) 用一微量試管,將試液一滴蒸發(fā)至干,并在110°下保持短時間。加入過量干透的硫氰酸鉀,混合物在浴中加熱至200~250°。將一張曾用10%醋酸鉛溶液潤濕過的濾紙放在試管口上。如有氨基酸類存在,濾紙上就會觀察到黑色。若提供試驗的為氨基酸的堿性溶液(原來的堿類是用醚或氯仿萃取的),可將試液一滴和1:1鹽酸一滴蒸發(fā),然后按照上述處理干透(110°)的殘渣。
下列各物量可被檢出:
15微克 甘氨酸(氨基乙酸) | 25微克 氨茴酸 |
50微克 乙酰替甘氨酸 | 50微克 對-氨基苯磺酸 |
下列氨基酸類也會發(fā)生反應:苯基丙氨酸(α-氨基-β-苯基-丙酸);酪氨酸〔β-(對羥苯基)-丙氨酸〕;天冬氨酸(氨基代琥珀酸);蛋氨酸(2-氨基-4-甲硫基丁酸);白氨酸(α-氨基異己酸);酪胺(4-對羥苯基乙胺);對-氨基水楊酸;1-氨基-2-萘酚-4-磺酸;甲基紅(對-二甲胺基苯偶氮基苯鄰-羧酸);H-酸(1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸)。
按照氨基酸的性質(zhì),磺胺(對-氨基苯磺酰胺),磺胺嘧啶(2-對-氨基苯磺酰胺基嘧啶)及其他磺胺藥物,都會給出正反應。巴比土酸及其衍生物,除5-硝基巴比土酸外,亦現(xiàn)正反應。
乙(撐)二胺-四醋酸堿金屬鹽的性行是饒有趣味的。其酸性的二鈉鹽和熔化的硫氰酸鉀,立即產(chǎn)生硫化氫,但其四鈉鹽則不活潑。因此,這些堿金屬鹽就可易于區(qū)別。
脂族α-和β-氨基羧酸類用氯胺T氧化的試驗法
堿金屬次氯酸鹽作用于上述的氨基羧酸類,將會發(fā)生氧化的脫羧基和脫氨基。因此,這些酸類可因加入小量次氯酸鈉并注視次氯酸鹽的消失來作出檢定。氯胺T可得更好的結(jié)果,因它會發(fā)生水解,其作用似次氯酸鹽給予體:
并且通過它能使硫代米奇勒氏酮發(fā)生氧化來形成藍色醌型二硫化物,而易于検出。
這里所述的操作手續(xù)僅能適用于可被氯胺T氧化的化合物不存在時。這些干擾物質(zhì)的例子為:硫醇化合物類、對-氨基苯酚、亞硝基化合物;無機還原劑也不可存在。
操作手續(xù) 在滴試板的毗鄰凹槽內(nèi),分別放水和試液各一滴。每一凹槽內(nèi)都各用0.01%氯胺T的水溶液一滴處理,并在預熱至120°的烘箱內(nèi)保存3-4分鐘。讓滴試板冷卻5分鐘,然后將這兩個試樣都用0.1%硫代米奇勒氏酮的酒精溶液一滴處理。黃、綠、淺藍或籃紫色的出現(xiàn),表示正反應??瞻自囼瀸F(xiàn)出深紫色。不溶于水的氨基酸類,應在進行試驗前溶于0.2N鹽酸中,而將制成的溶液用微量碳酸鈣使之中和。
下列各物量可被檢出: