葡聚糖凝膠G15
中文名稱 葡聚糖凝膠G15
英文名稱 Sephadex G15;
分子式 C17H26INO3
分子量 A.肽及球形蛋白質(zhì):3000~80000;B. 葡聚糖(線性分子):1000~50000
CAS號(hào) 11081-40-6
質(zhì)檢信息
質(zhì)檢項(xiàng)目 指標(biāo)值
含量,% ≥98.0
干顆粒直徑: 40~120um
PH: 2~13
床體積毫升/克干分子篩:10~12ml/g
基本信息
葡聚糖凝膠是一種白色珠?;蚍勰瑢儆H水性凝膠。性穩(wěn)定,不溶于水,弱酸和堿溶液,遇強(qiáng)酸能使糖苷鍵分解,含有大量的羥基,指的是由一定平均相對(duì)分子質(zhì)量的葡聚糖(dextran) 和甘油基以醚橋形式相互交聯(lián)而成,具有立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),應(yīng)用面廣的一類凝膠,不溶于溶劑(除非它被化學(xué)降解)。它在水、鹽溶液、有機(jī)溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩(wěn)定的,在強(qiáng)酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長(zhǎng)期接觸氧化劑將破壞凝膠,因而應(yīng)避免使用。
產(chǎn)品用途
葡聚糖凝膠利用分子篩作用,進(jìn)行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測(cè)定。交聯(lián)葡聚糖的商品名為Sephndex,不同規(guī)格型號(hào)的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯?dāng)?shù)為凝膠得水值的10倍。
生產(chǎn)方法
將葡聚糖,氫氧化鈉溶解于蒸餾水中配置成葡聚糖堿液;稱取適 量聚醋酸乙烯脂,在攪拌條件下溶解于環(huán)氧氯丙烷中,配置成聚醋酸乙烯脂環(huán)氧氯丙烷溶液;在攪拌的條件下,將葡聚糖堿液倒入聚醋酸乙烯脂環(huán)氧氯丙烷溶液中, 進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng),反應(yīng)產(chǎn)物依次洗滌后,再經(jīng)烘干即可得產(chǎn)品.
使用方法
1.葡聚糖凝膠預(yù)處理:
在室溫下,將葡聚糖凝膠干粉浸泡于蒸餾水中至少24小時(shí),并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,或者用蒸餾水煮沸至少1小時(shí)直至充分溶脹,凝膠體積不再變化。
注:在溶脹前,加入蒸餾水?dāng)嚢韬笫蛊渥匀怀两?,沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒較多,需要重復(fù)多次漂洗將其除去,防止層析時(shí)阻塞凝膠柱,影響流速。
2.裝柱:
將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層; 裝柱要均勻,可在凝膠耐受的操作壓下裝柱,裝好的凝膠柱可以檢測(cè)柱效,檢測(cè)過濾柱裝填是否合格。
凝膠層析分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度:分級(jí)分離時(shí),一般需要100cm左右長(zhǎng)的層析柱,柱高與直徑之比為20~100:1,柱高過高時(shí),凝膠擠壓變形阻塞會(huì)引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免;分組分離(例如脫鹽)時(shí)用短柱,柱高控制在40~50cm以下,柱高與直徑的比約為5~10:1。
3.平衡:
上樣前用平衡液平衡層析柱至少3~5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(例如流出液的pH值等于上柱的Buffer的PH值);
4.上樣:
分級(jí)分離時(shí)上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積。
樣品溶液如有雜質(zhì)或沉淀應(yīng)過濾或離心除去,樣品的粘度不能過高,否則影響分離效果。
5.洗脫方法:
可以用無鹽水,也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以完全分離純化;
6.在位清洗(CIP)
凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向清洗四個(gè)柱體積,再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。
7.保存
凝膠柱暫時(shí)不用,可將其回收,一般方法是將凝膠用水沖洗干凈濾干,可加入0.02%疊氮化鈉防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生長(zhǎng)。
產(chǎn)品信息 [重量] 25g [顏色] 白色 危險(xiǎn)性類別 [危險(xiǎn)性類別] 非危險(xiǎn)品