轉(zhuǎn)化成乙醇酸的試驗(yàn)法
有機(jī)化合物內(nèi)的NH2基團(tuán),可因該化合物和亞硝酸一起溫?zé)岫cOH基團(tuán)交換。因此可從氨基醋酸來(lái)形成羥基醋酸(乙醇酸):
CH2NH2COOH+HNO2 → CH2OHCOOH+H2O+N2 (1)
乙醇酸如和濃硫酸緩和地加熱,會(huì)引起分裂而形成甲醛:
CH2OHCOOH → CH2O+CO+H2O (2)
由于甲醛和濃硫酸及鉻變酸會(huì)產(chǎn)生紫色,如將反應(yīng)(2)于有鉻變酸存在下進(jìn)行,這個(gè)顯色反應(yīng)就會(huì)發(fā)生。所以如將甘氨酸轉(zhuǎn)化成乙醇酸,如反應(yīng)(1)所示,就可利用甲醛-鉻變酸反應(yīng)來(lái)作出檢定。
其它氨基酸類,對(duì)這試驗(yàn)并無(wú)干擾,因?yàn)橹挥懈拾彼峥杀晦D(zhuǎn)化成乙醇酸。
這里所述的試驗(yàn)法,在有能產(chǎn)生甲醛的化合物,如六甲撐四胺及其鹽類或次硫酸鹽等存在時(shí),都不適用。
操作手續(xù) 試驗(yàn)在微量試管中進(jìn)行。試液一滴與1%亞硝酸鈉溶液及濃鹽酸各一滴混和?;旌衔镌谧杂苫鹧嫔霞訜嶂练衅?。在105~110°蒸發(fā)后,將殘?jiān)鋮s,而用新配的試劑2~3滴處理?;旌衔锓欧兴≈斜3?~10分鐘。如現(xiàn)紫色即示明有甘氨酸存在。
試劑:將鉻變酸在濃硫酸中的懸浮體緩和地加熱并進(jìn)行離心分離。其上層的清液可用作試劑。
鑒定限度:10微克 氨基醋酸
降解成甲醛的試驗(yàn)法
α-氨基酸類如用堿金屬次鹵酸鹽處理,就會(huì)脫去羧基及氨基而形成醛類,其中所含碳原子的數(shù)目比原來(lái)氨基酸中少了一個(gè)。在甘氨酸(α-丙氨酸與酪氨酸也可被氯胺T降解成醛類,其中碳原子的數(shù)目比其原來(lái)的化合物也少了一個(gè))的事例中,變成甲醛的降解是易用氯胺T來(lái)達(dá)到的。這個(gè)次氯酸鹽衍生物的利用,具有減輕甲醛(可用鉻變酸試驗(yàn)法進(jìn)行檢定)發(fā)生氧化的優(yōu)點(diǎn)。
下面所述的試驗(yàn),在氨基酸這一族中,對(duì)于甘氨酸是有特效性的。用鉻變酸處理時(shí)能分裂出CH2O的化合物必不可存在,或在事前先予破壞。
操作手續(xù) 在一微量試管中,將0.5%氯胺T新配成的水溶液一滴加到試液一滴中,再將混合物放熱水浴中溫?zé)?~5分鐘。冷卻后,加入濃硫酸5滴及極小量的固體鉻變酸。紫色立即或在水浴中加熱短時(shí)后出現(xiàn),都示正反應(yīng)。
鑒定限度:3微克 甘氨酸